无菌工艺验证培养基灌封试验.ppt

验证开始前的准备工作 设备确认 通风系统（HVAC）的确认 设备的在线清洗和灭菌CIP,SIP 灭（除）菌工艺验证 湿热、干热灭菌工艺 除菌过滤 空气过滤器的完好性检测 容器/胶塞密封完好性测试 人员培训 洁净室环境达到设计要求 * 第二十八页，共五十页。 培养基灌封实验方案的内容举例 定义被模拟的工艺 定义使用的房间，灌封线和设备 使用的容器和密封件的类型 灌装线的速度 灌封数量 模拟过程中的干扰和中断的数目和类型 参与的人员数目 使用的培养基 灌封到容器内培养基的体积 选择的最差条件及其原理 培养条件，培养温度，培养时间 所进行的环境监测 批记录复印件 职责说明 所有工作的合格标准 列举最终报告中需要的文件 本次模拟的持续时间 * 第二十九页，共五十页。 方案的执行与记录（一） 培养基灌封的日期和时间 使用的房间和设备 容器胶塞的型号和尺寸 培养基种类和灭菌方式 每容器中的灌装体积 灌装速度 灌封的瓶数，灯检丢弃的瓶数和原因 培养的瓶数，阳性的数量 培养时间和温度 * 第三十页，共五十页。 方案的执行与记录（二） 环境监测的数据 参与培养基灌封的人员 培养基灵敏度检查的结果 有无阳性结果。如有，要给出微生物鉴定的结果。 如发生异常情况，需给出调查报告。 * 第三十一页，共五十页。 培养基灌封实验中的环境监测 环境监测－按照相应的规程进行，包括： 空气粒子数 沉降碟 浮游菌 表面监测 人员监测 对无菌生产区环境的评估 * 第三十二页，共五十页。 培养基灌封实验中的灵敏度检查实验 培养基灵敏度检查实验： 使用完成14天培养的灌封前期培养基样品 用枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠球菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉和环境菌作为阳性菌 将每个菌种准备含100cfu/0.1ml的菌液，每个菌种接种2支培养基样品，同时并平板计数（双份） 对真菌在20-25?C下培养，对细菌在30-35 ?C下培养，每天检查，5天内需有生长迹象 * 第三十三页，共五十页。 再验证与增补性验证的要求 再验证 对每条生产线，每年进行两次再验证，间隔时间为5-7个月 。 人员至少每年参加一次再验证，以进行资格再确认。 每条生产线轮流使用最大和最小规格的容器，变换生产线的速度。 增补性验证 根据风险程度决定培养基灌封实验的批数。通常为1-3批。 * 第三十四页，共五十页。 培养基灌封实验的总结报告 最终报告中应包括以下内容 模拟的最差条件 事件清单 环境监测结果 微生物鉴别结果 培养基的营养检查实验结果 培养条件、结果读取日、结果读取人、每位参与者的灌装瓶数等信息。 结论（结果是否可以接受） 合格证书 工艺验证/再验证合格证书 人员资格确认证书 * 第三十五页，共五十页。 难点讨论 * 第三十六页，共五十页。 培养基灌封实验阳性结果的调查 (一) 调查的范围应包括 环境微生物监测数据，空气悬浮粒子监测数据　 CIP设备，清洁、消毒程序的执行情况 培养基、设备和零件的灭菌工艺，灭菌釜的校正情况 高效过滤器检测 (空气悬浮粒子水平，过滤器检漏，风速测量，密封系统检查，使用年限等) 除菌过滤器完好性 房间气流型式与压差 人员操作技术培训情况 * 第三十七页，共五十页。 培养基灌封实验阳性结果的调查 (二) 调查的范围还应包括 以往产品无菌检查实验结果 人员卫生状况监测数据 培养基灌装实验中的干预方式分析 该区域近期是否有过维修活动，生产线的改造情况 该生产线培养基灌封实验历史数据 已灭菌物品的储存条件 培养基灌封过程中的异常事件 阳性污染菌与环境监测污染菌的鉴别 * 第三十八页，共五十页。 培养基灌封实验阳性结果的调查 (三) 调查结论与风险评估 培养基灌封实验结果有效 暂停生产，直至确定污染来源并采取有效的纠偏措施。 再验证合格后，产品方可放行。 对培养基灌封实验后和此前所生产的产品，进行风险评估 培养基灌封实验结果无效→重新进行培养基灌封实验 条件1　　无菌灌装区的物理条件不满足要求 条件2　　人员未按照正常生产程序操作 * 第三十九页，共五十页。 培养基灌封后的生产 培养基灌封后可以进行生产，但要等培养基灌封合格后产品才能放行（产品有报废的风险）。 无效的培养基灌封后可以进行生产，但所生产的批次要在成功培养基灌封后方可放行。 培养基灌封失败 生产线不能用来生产，根据调查结果决定培养基灌封的次数和数量，培养基灌封合格后，才能生产。 * 第四十页，共五十页。 讨论：最差条件 Worst Case 最差条件 高于或低于正常范围的条件限度，与正常生产条件相比最有可能造成工艺或生产失败的条件。 注意 如果某些做法会带来污染的风险，则不允许用培养基灌封的结果为它的不合理的进行辩护 * 第四十一页，共五十页。 最差条件的设计（1） 储存时间Holdin