细胞工程1分析和总结.docxVIP

一、细胞工程简介 1、细胞工程：是应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。（除基因工程外的另一门现代生物工程的前沿科学；争论最大的一门生物技术。）（前沿性；争议性；综合性；应用性） 二、细胞工程基础 2、细胞全能性：是指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。 3、脱分化：又称去分化，是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程，即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。 4、再分化：是指在离体条件下，无序生长的脱分化的细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。细胞再分化过程事实上是基因选择性表达与修饰的人工调控过程。 三、植物组织与器官培养 5、植物组织培养：是指将植物组织在适当培养条件下诱导长成完整植株的技术。 （离体条件）（应用：快速繁殖；种苗脱毒；远源杂交；突变育种；基因工程；生物制品）（特点：培养条件可以人为控制；生长周期短，繁殖率高；管理方便，利于工厂化生产和自动化控制） 6、愈伤组织：脱分化后的细胞经过细胞分裂产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团。 7、外植体：植物体上切取下来进行培养的部分组织或器官。 8、器官发生三种方式：先发芽后生根；先生根后发芽；同时生根发芽。 9、植物激素（植物生长调节物）：是自然状态下产生的、对生长发育有显著作用的微量有机物。包括生长素、细胞分裂素、赤霉素、乙烯等。 10、生长素：是一类含有一个不饱和芳香族环和一个乙酸侧链的内源激素。（吲哚乙酸（IAA）天然存在的生长素，亦可人工合成，其活力较低，是生长素中活力最弱的激素，对器官形成的副作用小，高温高压易被破坏，也易被细胞中的1AA 分解酶降解，受光也易分解。2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）起动能力比IAA 高 10 倍，特别在促进愈伤组织的形成上活力最高，但强烈抑制芽的形成，影响器官的发育，适宜的用量范围较狭窄，过量常有毒效应。萘乙酸（NAA）在组织培养中的起动能力要比 IAA 高出 3-4 倍，且由于可大批量人工合成，耐高温高压， 不易被分解破坏。吲哚丁酸（IBA）促进发根能力较强的生长调节物质。） 11、细胞分裂素：是一类促进细胞分裂、诱导芽的形成并促进其生长的植物激素。(这类激素是腺嘌吟的衍生物，包括 6—BA(6—苄基氨基嘌呤)、Kt (kinetin 激动素)、Zt (zeatin 玉米素)等。其中 Zt 活性最强，但非常昂贵，常用的是 6—BA。在培养基中添加细胞分裂素有三个作用：①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长。② 促进细胞分裂与扩大。③抑制根的分化。因此，细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化和茎、苗的增殖，而在生根培养时使用较少或用量较低。) 12、赤霉素：主要用于促进幼苗茎的伸长生长，促进不定胚发育成小植株；赤霉素和生长素协同作用，对形成层的分化有影响，当生长素／赤霉素比值高时有利于木质部分化，比值低时有利于韧皮部分化；此外，赤霉素还用于打破休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发。一般在器官形成后，添加赤霉素可促进器官或胚状体的生长。 13、(1)富盐平衡培养基：MS 培养基 它是 1962 年由 Murashige 和 Skoog 为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。（另：LS、BL、BM、ER 等） (2)高硝态氮培养基：B5 培养基 是 1968 年由 Galmborg 等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在 B5 培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物。N6 培养基 是 1974 年为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成分较简单，KNO3 和（NH4）2SO4 含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。（另：SH） 中盐培养基代表培养基有 Nitsch、Miller、Blaydes、H 等。大多是在 MS 培养基基础上进行改良设计。特点：大量元素无机盐为 MS 的一半，微量元素种类减少，但含量增高，维生素种类比 MS 增多，例如增加了生物素、叶酸等。 低盐培养基 White 培养基 是 1943 年由 White 为培养番茄根尖而设计的。1963 年又作了改良，称作 White 改良培养基，提高了 MsSO4 的浓度和增加了硼素。其特点是无机机盐数量较低，适于生根培养。（另：WS、HE、HB） KM