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3.受试生物半衰期测定法 生物半衰期是指一种外来化合物在体内 消除到原有浓度的一半所需要的时间。 生物半减期T＝  图2 LPIC的流程图 2. 6低压泵 3注射阀5混合器 7反应试剂 8反应盘管 9流通池 10检测器11计算机 浓度 信号 ———————————— | | | | | | Mg2+ Mg2+ 第三节 生物的分子和细胞水平检测 一、加合物的测定 （一）DNA－加合物的测定 DNA－加合物是化学物经生物转化后的亲电活性产物与DNA链特异位点上的共价结合物。 加合物的位点 多在N －7鸟嘌呤，O －6鸟嘌呤， N －1 －或N －3 －腺嘌呤。 N N N N H H H H N N N N H H H H 1 2 3 4 5 6 7 8 9 嘌呤 NH2 腺嘌呤 adenine （A） N N N N H H H H O H2N 鸟嘌呤 guanine （G） N N H H H H 嘧啶 1 2 3 4 5 6 N N H H H H NH2 O H 胞嘧啶 Cytosine （C） N N H H H H O O H H 尿嘧啶 uracil （U） N N H H H H O O H H CH3 胸腺嘧啶 thymine （T） （二）蛋白加合物的测定 各种蛋白质亦可作为大分子形成化学物质加合物。 血红蛋白（Hb)在一定程度上可以代替DNA 用于检测加合物，虽然化合物与Hb 的加合并不致癌，但由于Hb也具有亲核中心，可与亲电物质反应形成稳定的Hb －加合物，因而Hb －加合物可间接反映连接于DNA 的加合物。 （二）蛋白加合物的测定 退色光度法：蛋白质分子与染料分子结合，吸光度降低，降低强度与浓度成正比。 非共振瑞利散射法：蛋白质分子与有机大分子（染料、表面活性剂）或纳米材料结合，产生非共振瑞利散射现象，以次进行定性和定量检测。 二、一般代谢酶的活性测定 乙酰胆碱酯酶 腺三磷酶 三、解毒系统酶类诱导作用的检测 混合功能氧化酶的诱导作用 谷胱甘肽硫转移酶 四、抗氧化防御系统检测 过氧化氢酶 谷胱甘肽过氧化酶 第四节 生物致突变、致畸和致癌效应检测 基本概念 突变（Mutation） 基因突变（Gene Mutation ）和染色体畸变（Chromosome Mutation ） 致突变作用（Mutagenesis）和致突变物（Mutagen） 致突变试验的目的 致突变试验的目的是为了检查受试物对机体遗传过程有无影响的方法。 鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验法 Ames试验原理 同一种微生物的营养缺陷型突变型菌株与受试物接触，若此化学物质具有致突变性，可使突变型微生物再发生一次突变，重新成为野生型微生物。这种突变叫做回复突变。 注释1：营养缺陷型突变型菌株 注释2：野生型微生物 突变率＝诱发回复突变菌落数 / 自发回复突变的菌落数（对照） 当突变率大于2.0时，为阳性结果。 为使受试物在体外测试中受到活体类似的代谢活化作用，在实验中采用了将哺乳动物的肝细胞微粒体及受氢系统一并加入培养基中，进一步提高了实验方法的灵敏度。 污染物的生物效应检测 第一节 生物测试及方式 第二节 一般毒性试验 第三节 生物的分子和细胞水平检测 第四节 生物致突变、致畸和致癌效应 检测 第五节 微宇宙法 第一节 生物测试及方式 一、生物测试（Bioassay）的定义： 指系统地利用生物的反应测定一种或多种污染物或环境因素单独或联合存在时所导致的影响或危害。 所利用的生物反应包括分子、细胞、组织、器官、个体、种群、群落、生态系统各级水平上的反应。 生物测试不同于常规的物理、化学检测。前者能够测定污染物对生物机体的影响，而后者只能测定污染物的浓度。 生物测试优点：方法简单、无需特殊仪器、能综合反映污染物对生物体的影响。 生物测试意义：制定排放标准、环境质量标准以及生态风险评价的重要依据。 通过水污染的生物测试可获得以下数据： 1、 环境状况对水中生命的适合度 2、各种环境因素如DO、pH、温度、混 浊度等对生命的有利以及不利的浓度或强度 3、环境因素对于废物毒性的影响 4、污染物对受测生物的毒性 5、各种水生生物对污染物的相对敏感性 6、废水所应处理的程度 7、允许的污染物排放浓度等。 8、有关水质标准、对废水的要求和排放许可之间的一致性。 二、生物测试的方式 （一）生物测试的分类 短期生物测试（Short Term Bioassays） 被测试的生物在短期内暴露于高浓度