基因操作的主要技术原.ppt

第一章 基因操作的主要技术原理; 凝胶电泳是一种分析鉴定重组DNA分子、蛋白质、蛋白质与核酸相互作用的重要实验手段，同时也是分子生物学研究方法的技术基础。 ;;按凝胶材料分: 聚丙烯酰胺凝胶 琼脂糖凝胶电泳(普通和低熔点琼脂糖) 按电泳装置分: 水平式/琼脂糖凝胶 竖式/聚丙烯酰胺凝胶 两种方法比较：分离效果和分离范围; 操作难易 ;基本原理 带有负电荷的DNA或RNA核苷酸链， 依靠稳定的无反应活性的介质（琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶）和缓冲液， 在电场中以一定的迁移率从负极移向正极。 根据核酸分子大小不同、构型或形状的差异，以及所带电荷的不同， 可以通过电泳将其混合物中的不同成分彼此分开。 ;;?用途;取决于核酸分子本身的大小和构型 分子量较小的DNA分子，比分子量较大的DNA分子迁移率要快； 同等分子量的不同构型的核酸分子，构型紧密的比松散型的开环DNA分子或线性DNA分子迁移率要快。; 与凝胶的类型和密度相关 琼脂糖凝胶的分辨力在0.2～50Kb之间; 聚丙烯酰胺的分辨力在1～1000bp之间；;Separation Range of Agarose;PolyAcrylamide Gels (PAGE);琼脂糖： 一种从红色海藻中提取出的线性多糖聚合物。 分为 常熔点的琼脂糖 低熔点（LMP）琼脂糖