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氨基酸分离分析PPT课件会计学第1页/共13页物质不仅在互不相溶的两液相间分配，也可以在固相-液相间或在气相-液相间分配。层析系统中的固定相可以是固相、液相或固-液相混合相（半液体）；流动相可以是液相或气相，它充满于静相的空隙中，并能流过静相。某一物质在动相中的总量 CA x VAKeff =Keff = CB x VB某一物质在静相中的总量第2页/共13页Keff = Kd×Rv(A,B两相的体积比)某一物质分配不直接决定于它的分配系数(Kd)，而取决于它的有效分配系数Keff 。 Keff差异越大的物质越容易分开。连接保持恒压力的洗脱液池（溶器）第3页/共13页二、 分配柱层析装置洗脱液圆形滤纸，以免扰乱表面填充物 固尼龙网格、烧结玻片或其他支持物尽可能小的死体积分部收集管设想的板层：固+流第4页/共13页柱层析：层析柱中的填充物（支持剂）都是一些具有亲水性的不溶物质：纤维素、淀粉、硅胶等。它们吸附一层不流动的结合水，可以看作固定相，流过的互不溶的溶剂是流动相。纸层析：滤纸纤维素上吸附的水是固定相，展层用的溶剂是流动相。混合氨基酸在这两相中不断分配而被分布在滤纸的不同位置上。只要实验条件确定，每种氨基酸的相对迁移率恒定。分离、鉴定氨基酸的常用技术。+ 原点丁醇-醋酸酚-甲酚-水第5页/共13页三、纸层析氨基酸的双向纸层析图谱XY纸层析中的Rf值（相对迁移率）第6页/共13页溶剂前沿氨基酸显色点滤纸原点Rf=第7页/共13页四、薄层层析——纤维素粉、硅胶和氧化铝粉分辨率高、所需样品量微盖子层析缸层析板溶剂第8页/共13页五、离子交换柱层析离子交换树脂（支持剂）。含酸性基团或碱性基团，解离出H+ 或OH-与被分离物中相应的离子交换而“挂”在树脂上。磺酸型阳离子交换树脂（支持剂）第9页/共13页离子交换柱层析——自动化样品注入口泵洗脱液第10页/共13页离子交换——自动分析仪流出液/ml洗脱的先后顺序取决于氨基酸的所带电荷与离子交换树脂的静电吸引和疏水相互作用两者的综合作用的结果第11页/共13页气相色谱连接记录仪 氨基酸与异硫氰酸苯酯反应生成PTH-氨基酸，然后经三甲基硅烷基化，得到易于气化的氨基酸衍生物。储液缸第12页/共13页高效液相色谱(high performance liquid chromatograph，简称HPLC)又称高压液相色谱过滤器进样室恒温装置压力泵层析柱检测器记录仪收集器