抗氧化酶活性等测定方法.docxVIP

PAGE PAGE 1 叶绿体的提取 一、试剂配置 1、PBS 提取液：每 L 水依次加入MES(195.2×0.05=9.76g)、山梨糖醇(0.33×182.2=60.126g)、NaCl（0.010 ×58.5=0.585g）、MgCl（0.002×95=0.19g）、EDTA（292.25×0.002=0.5845g）、KH PO（200×0.0005=0.1g）； 2 4 使用时加入ASA-Na（198.1×0.002=0.3962g）; 2、悬浮液：将PBS 提取液中的MES 换为 238.3×0.05=11.915g 的 HEPES（238.3×0.05=11.915g）； 3、80%Percol：80ml 原液+20ml 水；40%Percol：40ml 原液+60ml 水； 实际配制： PBS 提取液 2000ml(3 个处理*2 个品种*3 个重复*20ml*3 次=1080ml), 悬浮液 100ml（3 个处理*2 个品种*3 个重复*1ml*3 次=54ml）; 80%Percol 200ml; 40%Percol 200ml.（3 个处理*2 个品种*3 个重复*3ml*3 次=162ml） 二、提取步骤 1、10g 鲜样加 20ml 提取PBS（50mM MES PH6.1，含 0.33M 山梨糖醇，10mM NaCl，2mM MgCl ，2mM