器官发生与体细胞胚胎发生.ppt

（三）根的诱导 这一阶段的目的是使第二阶段通过腋芽生长和不定芽形成途径得到的嫩枝生根产生小植株，以便移栽。很多草本植物的不定根的形成是很容易的，但木本植物一般要困难些，其中从成年树得到的材料就更困难。由于生长的嫩枝本身能全盛丰富的生长素，所以一部分植物可在无激素的培养基上生根。 第三十页，共四十九页，2022年，8月28日 1．剪下无根苗转接到生根培养基中，试管苗的生根，对基本培养基的种类要求不严，如MS、B5、White等培养基，都可用于诱导生根，但是其含盐浓度要适当加以稀释。前面的几种培养基中，除White外，都富含N，P，K盐，它们都抑制根的发生。因此，应将它们降低到1／2，1／3或1／4，甚至更低的水平。生根培养基适当加大生长素的浓度，不用或少用细胞分裂素，生长素浓度在0.1-10mg/l，使用较多的是NAA，其次为IAA和IBA，生长素浓度过高时容易引起愈伤组织化和抑制根的生长。培养基中蔗糖的浓度降低到1.0-1.5%，以增强植株的自养能力。培养基不宜过硬以免影响生根，可在培养基中加入1%左右的活性碳，为提高小植株的光合能力，可将光强度增加到3000-10000lux，光周期可用24小时光照或16小时，8小时黑暗以利于光形成建成。 第三十一页，共四十九页，2022年，8月28日 2．对较难诱导生根的植物，可先半无根苗浸泡在高浓度生长素（100mg/L）的无菌水中几小时到1天，用无菌水洗净生长素后再接种到生根培养基。对蔷薇科的果树如苹果、梨等，可在生根培养基中加入适量的根皮苷或根皮酚（间苯三酚）以促进根的形成，浓度约150 mg/L，但也发现对一种李树而PG加入后反而抑制根的形成，说明PG的刺激效应可能因基因型而不同。 3．嫁接到根系发达、抗逆性强的合适砧木上，如三倍体西瓜苗接到瓠子上，在25-30℃、饱和湿度条件下，三天伤口长出愈伤，一周可成活。 第三十二页，共四十九页，2022年，8月28日 （四）移栽 第三十三页，共四十九页，2022年，8月28日 植物无病毒苗的培育 第三十四页，共四十九页，2022年，8月28日 一、病毒在植物上的危害 病毒的危害给植物生产带来的损失是很大的，如草莓病毒的危害，使草莓产量严重降低，品质大大退化。葡萄扇叶病毒使葡萄减产l0%-18%，为害马铃薯的病虫害则更多，大约有几卜种，田此，给马铃薯生产带来严重障碍。花卉病毒的危害一般会影响花卉的观赏价值，其表现是花少而小，产生畸形、变色等。 由于病毒对植物造成如此严重的危害。所以世界各国都开始重视这方面的研究，如日本用柑桔茎尖微嫁接繁殖无病毒柑桔营养系。美国用组织培养法，使苹果无病毒苗已工厂化育苗，并在各国普遍开展。 二、无病毒苗培育的意义 用组织培养方法生产无毒苗，是一个积极有效的途径，由于排除了使用药剂，所以对减少污染，防止公害，保护环境都有积极的意义。 第三十五页，共四十九页，2022年，8月28日 第一页，共四十九页，2022年，8月28日 器官发生与体细胞胚胎发生 一．器官发生 （一）概念：离体培养的组织、细胞在诱导条件下经分裂和增殖再分化形成根和芽等器官的过程。 （二）发生方式：有两种发生方式 （1）直接发生：（具有初生分生能力的）外植体直接分化成器官的过程。（由茎尖、腋芽、原球茎、块茎、鳞茎等器官发生） （2）间接发生：外植体（已分化的成熟组织）经脱分化形成愈伤组织再分化形成器官的过程。 第二页，共四十九页，2022年，8月28日 二）胚状体方式(somatic embryo) 指由培养细胞诱导分化出具胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。 由外植体经胚状体形成完整植株可分三个不同发育阶段： 1)外植体细胞脱分化。外植体发生细胞分裂，或进而形成愈伤组织。这一阶段同不定芽方式一样。 2)胚状体形成 在植物有性生殖中，精于和卵子结合形成合子，合子进一步发育成胚。但在组织培养条件下胚状体的发育过程是：细胞经脱分化后，发生持续细胞分裂增殖，并依次经过原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期，进而成为成熟的有机体。我们把由愈伤组织的类似薄壁组织细胞不经有性过程而直接产生类似胚的这一结构，称为胚状体。 3)胚状体再发育成完整植株 在外观上，这种方式和不定芽均有光滑、圆形突起的形状。 第三页，共四十九页，2022年，8月28日 由外植体经胚状体形成完整植株可分三个不同发育阶段： 1)外植体细胞脱分化。外植体发生细胞分裂，或进而形成愈伤组织。这一阶段同不定芽方式一样。 2)胚状体形成 在植物有性生殖中，精于和卵子结合形成合子，合子进一步发育成胚。在组织培养条件下胚状体的发育过程类似于合子胚的发育：细胞经脱分化后，发生持续细胞分裂增殖，并依次经过