天然产物的提取分离和结构鉴定.ppt

第九十五页，共一百三十七页，2022年，8月28日 假定从柱上加入试样算起，至某个组分集中流出时所需溶剂体积为Ve（洗脱体积），则Ve与组分分子量之间有下列关系： Ve=K1-K2lgM K1、K2为常数，故洗脱体积只取决于分子量的大小。 M越大，则Ve越小； M越小，则Ve越大。 第九十六页，共一百三十七页，2022年，8月28日 第六十三页，共一百三十七页，2022年，8月28日 溶质（被分离成分） 如果吸附剂和展开剂极性不变，被分离成分极性越大，吸附剂的吸附作用越强，展开距离越短；被分离成分极性越小，吸附剂的吸附作用越弱，展开距离越长。 被分离成分的极性主要取决于母核结构类型及官能团的极性。 第六十四页，共一百三十七页，2022年，8月28日 极性大小顺序：烷烃卤代烷醚酯酮醛酰胺胺 醇水酚羧酸 第六十五页，共一百三十七页，2022年，8月28日 小结 被分离成分与吸附剂、展开剂共同构成了吸附色谱中的三要素。 对硅胶、氧化铝等极性吸附剂来说，对极性大的化合物吸附强，移动慢，Rf值小；而对极性小的化合物吸附弱，Rf值大，从而将各成分分离开。 全面考虑吸附剂、展开剂和被分离成分三者的相互关系，是分离成败的关键。 第六十六页，共一百三十七页，2022年，8月28日 一、天然产物化学成分的预试验与提取 简单吸附法进行物质的浓缩与精制 简单吸附，如在结晶及重结晶过程中加入活 性炭进行的脱色、脱臭等操作，在物质精制 过程中应用很广。此外，从大量稀水溶液中 浓缩微量物质时，有时也采用简单吸附法， 如从一叶萩水浸液中提取一叶萩碱（用活性 炭吸附一叶萩碱）。 物理吸附的应用 第六十七页，共一百三十七页，2022年，8月28日 吸附色谱常见的操作方式是吸附薄层色谱（TLC）和吸附柱色谱。薄层色谱主要用于化学成分的分离、鉴定及探索柱色谱分离的条件，柱色谱主要用于化学成分的分离制备。 第六十八页，共一百三十七页，2022年，8月28日 薄层色谱（TLC） 微量、快速的色谱方法 应用：混合物的分离；纯物质的鉴定；监测反应进程；摸索和确定柱色谱的洗脱条件 根据分离原理不同：分为吸附薄层色谱（吸附剂）和分配薄层色谱（支持剂） 第六十九页，共一百三十七页，2022年，8月28日 （1）吸附薄层色谱法 此法是将吸附剂均匀地铺在玻璃板上形成薄层，把欲分离的试样溶液点加到薄层板的一端，然后用合适的展开剂展开，使混合物中各成分得以分离的方法。 基本原理：利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同以及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。 第七十页，共一百三十七页，2022年，8月28日 三要素：吸附剂、被分离成分、展开剂 化合物在吸附薄层上移动的速度与展开剂、被分离成分的极性有关。 展开剂的极性越大，化合物的移动速度越快；被分离成分的极性越大，移动速度越慢。 吸附薄层色谱条件的选择 第七十一页，共一百三十七页，2022年，8月28日 吸附薄层色谱的操作步骤 操作步骤：制板 活化 点样 展开 显色 计算Rf值 1、制板： ①选板 板的材质：金属板、玻璃板、塑料板 板的规格： 5×15㎝、5×20㎝、 10×10㎝、20×20㎝大小 ②清洗干燥： ③铺板： 板的种类： 软板（干法制板）：不含粘合剂 硬板（湿法制板）：含粘合剂 粘合剂：羧基基纤维素钠（CMC-Na) 淀粉、锻石膏(G)等 铺板方法：倾注法、平铺法、涂铺器法 第七十二页，共一百三十七页，2022年，8月28日 自动铺板器? 干法制板示意图 湿法制板示意图 注意：硬板必需要活化 阴干后于烘箱中110℃ 烘30分钟 第七十三页，共一百三十七页，2022年，8月28日 2、点 样 ①：点样工具 毛细管（0.5mm） 移液管 微量进样器 ②：样品处理 液体样品：直接点样 固体样品：极性相近、挥发性高的有机溶剂 切忌：不能用水或甲醇 ③：溶液浓度：1％～2％ ④：斑点直径：小于2-3mm ⑤：点样次数：一般2～3次，每次间隔一定时间（等溶剂挥发干） 1.5～2cm 起始线 原点 第七十四页，共一百三十七页，2022年，8月28日 3、展开 ㈠：注意避免边缘效应（要进行饱和处理） ㈡：展开方式：上行展开、下行展开 ㈢：展开要求：展开剂位于起始线以下 ㈣：展开时间：展开剂攀延到薄层板3/4处 展开缸盖 展开缸 薄层板 溶剂 展开操作示意图 理想展开 边缘效应 第七十五页，共一百三十七页，2022年，8月28日 4、显色 显色方法： 荧光显色： 化学显色： UV显色（紫外线显色） 荧光物质显色： 通用显色剂（I2）：未知成分常用 专属显色剂：特定官