临床检验初级检验技师：抗血清的鉴定和保存.docxVIP

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2022-11-24 发布于山东
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临床检验初级检验技师：抗血清的鉴定和保存.docx

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一、抗血清的鉴定 (一)抗体特异性的鉴定　常用双向免疫扩散法观察沉淀线若粗抗原及纯抗原之间皆出现一条沉淀线，且两者互相融合，则证明该动物已产生单价特异性抗体。若纯化抗原出现一条，而粗抗原出现多条线，且其中一条沉淀线与纯抗原沉淀线相连接，也是成功的免疫。若不出现沉淀线，表示免疫失败。 (二)抗体效价的测定颗粒性抗原采用凝集试验。可溶性抗原采用双向免疫扩散试验、ELISA。测定抗体效价有两种稀释方法：一种是将经过系列稀释的抗血清分别与一个浓度的抗原反应。另一种是同时稀释抗原和抗血清，分别与不同浓度的抗血清进行双向免疫扩散试验(称为棋盘滴定)。 (三)抗体纯度的测定采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)、双向免疫扩散试验、免疫电泳等方法。若只出现一条蛋白电泳区带说明抗体纯化已达到要求。若出现多条蛋白区带则表明抗血清中混有杂蛋白，须进一步纯化。 (四)抗体亲和力的测定二、抗血清的保存 (一)2～8℃保存：用于短期保存 (二)冷冻保存：是常用的抗体保存方法将抗体分为小包装，在-80～-20℃保存，一般可保存5年，效价不会明显下降，但应避免反复冻融。 (三)真空干燥保存：用真空冻干机进行干燥，封装后可长期保存，一般在冰箱中可保存5～10年。