临床检验初级检验技师：基因工程抗体的制备.docxVIP

一、基因工程抗体的概念 应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体基因按不同需要进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体，称为基因工程抗体 二、基因工程抗体的优点 1.通过基因工程技术的改造,可以降低甚至消除人体对抗体的排斥反应 2.基因工程抗体的分子量较小,可以部分降低抗体的鼠源性，更有利于穿透血管壁，进入病灶的核心部位 3.根据治疗的需要，制备新型抗体 4.可以采用原核细胞、真核细胞和植物等多种表达形式，大量表达抗体分子，大大降低了生产成本 三、人源化抗体 制备人源化抗体的主要目的是减少抗体的异源性 (一)嵌合抗体 从杂交瘤细胞中分离出功能性可变区基因,与人Ig恒定区的基因连接,插入适当质粒,构建鼠-人嵌合的重链和轻链基因质粒载体， 共同转染宿主细胞 (如骨髓瘤细胞)，表达鼠-人嵌合抗体 (二)改形抗体 利用基因工程技术，将人抗体可变区(V)中互补决定簇(CDR)序列改换成鼠源单抗CDR序列，重构成既具有鼠源性单抗的特异性，又保持抗体亲和力的人源化抗体 四、小分子抗体 小分子抗体包括抗原结合片段(Fv)、单链可变区片段(ScFv)和单区抗体(SdAb) 分子量小，可在大肠杆菌等原核细胞表达，在人体内穿透力强，有利于疾病的治疗 五、抗体融合蛋白 抗体融合蛋白是利用基因工程技术将抗体片段与其他生物活性蛋白融合所得的产物。 抗体融合蛋白具有多种生物学功能，并且表达的重组蛋白既不影响单链抗体的抗原结合能力，也不影响与之融合的蛋白质的生物学特性。 六、双特异性抗体 双特异性抗体(BsAb)又称双功能抗体(BFA),它的两个抗原结合位点具有不同的特异性，应用于结合两种不同的抗原分子，在生物医学中有着重要的意义 (一)化学交联BsAb (三)基因工程BsAb (二)细胞工程BsAb 七、噬菌体抗体库技术 是将体外克隆的抗体基因片段插入噬菌体载体，转染工程细菌进行表达，然后用抗原筛选即可获得特异的单克隆噬菌体抗体。 利用这一技术可以得到完全人源性的抗体,在HIV等病毒感染和肿瘤的诊断与治疗方面有其独特的优越性。