核酸的生物合成.pptVIP

4）单链结合酶 定义：结合于因DNA双链打开而形成的单股DNA链上的酶，称为单链机结合酶（DNA结合蛋白）。 意义：维持模板链处于单链状态； 保护单股DNA链不被核酸酶水解。 第三十页，共七十六页，2022年，8月28日 5）DNA连接酶 DNA连接酶，即连接两个冈崎片段； 一片段DNA链上脱氧核苷酸的3?羟基和相邻另一片段DNA链上脱氧核苷酸的5?磷酸基团，形成磷酸二酯键，从而把两个片段的DNA链连接起来。 5? 3? 5? 3? 5? 3? 5? 3? P HO DNA连接酶 ATP ADP 形成磷酸二酯键 第三十一页，共七十六页，2022年，8月28日 第三十二页，共七十六页，2022年，8月28日 根据目前的知识，可将DNA复制的过程大体分为三个阶段：起始、延伸和终止。 1.复制的起始 DNA合成的起始包括：起点的识别、模板DNA超螺旋及双螺旋的解除、引物的合成 复制的起始 （三）DNA的复制过程 第三十三页，共七十六页，2022年，8月28日 辨认起点 DNA复制有固定的起点（origin, ori)，即复制起点的一段特殊DNA序列。 区别：原核细胞中只有一个复制起点，而真核细胞DNA双链有多个复制起点。 E.coli 复制起始点 oriC 复制的起始 辨认起点 (举例） 第三十四页，共七十六页，2022年，8月28日 E.coli 复制起始点 oriC GATTNTTTATTT ··· GATCTNTTNTATT ··· GATCTCTTATTAG ··· 1 13 17 29 32 44 ···TGTGGATTA-‖-TTATACACA-‖-TTTGGATAA-‖-TTATCCACA 58 66 166 174 201 209 237 245 同向重复序列 反向重复序列 5? 3? 5? 3? 富含A、T 第三十五页，共七十六页，2022年，8月28日 辨认起点 复制的起始 辨认起点 （举例，特点） 复制起点的一般特征: ① 由多个独特的短重复序列组成。 ② 短重复序列能够被酶识别并结合。 ③ 一般富含A、T，利于双螺旋DNA解旋，以产生单链DNA复制模板。 第三十六页，共七十六页，2022年，8月28日 模板DNA解除高级结构 需要的酶：解螺旋酶、拓扑异构酶和DNA结合蛋白 复制的起始 辨认起点 （举例，特点） 解除高级结构 （复制叉） 详细作用过程 第三十七页，共七十六页，2022年，8月28日 经松弛DNA超螺旋结构后，解开一段双链，并由DNA结合蛋白保护和稳定DNA单链，形成复制点，又称为复制叉。 复制的起始 辨认起点 （举例，特点） 解除高级结构 （复制叉） 第三十八页，共七十六页，2022年，8月28日 引物RNA的合成 需要的酶：引物酶 合成过程：当两股单链暴露出足够数量碱基对时，引物酶发挥作用。引物酶能识别复制起点，并以四种核糖核苷酸为原料，以解开的一段DNA链为模板，按碱基配对规律，从5?? 3?方向合成引物RNA片段。 主要作用：提供了引物3?-OH末端 复制的起始 引物合成 辨认起点 （举例，特点） 解除高级结构 （复制叉） 第三十九页，共七十六页，2022年，8月28日 为什么需要有RNA引物来引发DNA复制呢? 复制的起始 这可能为尽量减少DNA复制起始处的突变有关。 DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。 引物合成 辨认起点 （举例，特点） 解除高级结构 （复制叉） 第四十页，共七十六页，2022年，8月28日 2.复制的延伸 需要的酶：DNA聚合酶Ⅲ（真核细胞为DNA Pol ?） 半不连续复制 前导链 随从链 如何保持前导链与随后链合成的协调一致？ 突环 复制的起始 复制的延伸 引物合成 辨认起点 （举例，特点） 解除高级结构 （复制叉） 第四十一页，共七十六页，2022年，8月28日 3.复制的终止（完整DNA链的形成） 复制的起始 复制的延伸 复制的终止 辨认起点 （举例，特点） 解除高级结