核酸生物合成 (2).pptVIP

第五十二页，共一百零二页，2022年，8月28日 3、DNA突变 第五十三页，共一百零二页，2022年，8月28日 第2节 RNA的生物合成 第五十四页，共一百零二页，2022年，8月28日 基因转录:以DNA为模板的RNA聚合酶的催化下，按照碱基配对原则，以四种NTP为原料，合成一条与DNA互补的RNA链的过程。 不对称转录:DNA双链中一条链的某一区段作为模板合成RNA，而另一条链不用于合成RNA。 转录起始于DNA模板的一个特定位点（启动子），并在一定位点终止（终止子），这个转录区域称为转录单位。 第五十五页，共一百零二页，2022年，8月28日 在转录中，双股DNA中只有一条链是模板（模板链）（反意义链） （-链） 另一条链为（编码链）（有意义链） （+链） 第五十六页，共一百零二页，2022年，8月28日 一、催化RNA合成的酶 1. 大肠杆菌RNA聚合酶 全酶= α2ββ’ σ 核心酶= α2ββ’ 　　　σ—识别转录起始信号。 β’—参与酶与底物的结合，以及与σ因子和核心 酶的结合。 β —参与σ因子和核心酶的结合，并参与RNA合成的引发、延伸。 α —与模板的结合、酶的滑动以及碱基识别有关。 第五十七页，共一百零二页，2022年，8月28日 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 ? ? ? ? ?? 核心酶(α2ββ?) 起始因子 β? ——和模板DNA结合 β ——起始和催化聚合反应 α ——酶的装配、结合启动子等 全酶(α2ββ? ?) 第五十八页，共一百零二页，2022年，8月28日 2. 真核细胞RNA聚合酶 　　　在DEAE-Sephadex柱上的洗脱次序称为酶Ⅰ、II、 Ⅲ，基于对鹅膏蕈碱的敏感程度称为酶A、B、C 第五十九页，共一百零二页，2022年，8月28日 二、转录的过程 第六十页，共一百零二页，2022年，8月28日 起始 延伸 终止 第六十一页，共一百零二页，2022年，8月28日 第六十二页，共一百零二页，2022年，8月28日 第六十三页，共一百零二页，2022年，8月28日 1.转录起始 3’ 5’ +1 转录起始点 AACTGT ATATTA TTGACA TATAAT 5’ 3’ －35序列 Sextama 框 －10序列 Pribnow框 启动子：RNA聚合酶全酶识别、结合、开始转录的DNA 　　　　　　 　　序列（双链） 原核生物启动子的特点: 　(1)DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)　(2)-10bp处 -TATAAT- (Pribnow box)　(3)-35bp处 -TTGACA- (识别区) 第六十四页，共一百零二页，2022年，8月28日 原核生物的转录起始 σ亚基辨认-35区 RNA pol 全酶移向-10区 合成第一个磷酸二酯键 5’-GpN-3’ 转录起始复合物 RNA pol(αββ′σ ) —DNA—pppGpN-OH σ亚基脱落 （结合松弛） （结合紧密） 转录起始不需引物！ 16/50 第六十五页，共一百零二页，2022年，8月28日 -35 -10 pppG或pppA 5‘ 5‘ 3‘ 3‘ 模板链 E ? 以NTP为原料和能量,DNA模板链为模形成核糖核酸链(RNA) 当几个核苷三磷酸掺入后， σ亚基就会被释放脱离核心酶。 2.链的延伸 第六十六页，共一百零二页，2022年，8月28日 第六十七页，共一百零二页，2022年，8月28日 3. 转录终止 终止子（terminator） ——提供转录终止信号的DNA序列 终止因子（termination factor） ——协助RNA Pol识别终止信号的辅助因子 第六十八页，共一百零二页，2022年，8月28日 起始 双链DNA局部解开 磷酸二酯键形成 终止阶段 解链区到达基因终点 延长阶段 5? 3? ? ? RNA 启动子Promoter 终止子terminator 5? ? RNA聚合酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 离开 第六十九页，共一百零二页，2022年，8月28日 三、RNA转录后加工 第七十页，共一百零二页，2022年，8月28日 1.rRNA 的转录后加工 rRNA基因转录原初产物 原核生物：30S 哺乳动物：45S RNase 第七十一页，共一百零二页，2022年，8月28日 第七十二页，共一百零二页，2022年，8月28日 （六）拓扑异构酶 拓扑异构酶：解除超螺旋 第二十页，共一百零二页，2022年，8月28日 第二十一页，共一百零二页，2022年，8月28日 第二十二页，共一百零二页，2022年，8月28日 二、DNA的复制 半保留复制方式 第二十三页，共一百