核酸的生物化学.pptVIP

大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ 第五十四页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA聚合酶Ⅲ全酶的结构 δ与β结合 两个α亚基各催化复制叉处一条链的合成。 第五十五页，共一百零八页，2022年，8月28日 哺乳动物的DNA聚合酶 PCNA：proliferating cell nuclear antigen，增殖细胞核抗原 第五十六页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA复制的几种类型 单向复制 双向复制 第五十七页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA的复制方式 直线双向 多起点双向 （真核细胞染色体） θ型双向 θ型单向 大肠杆菌染色体DNA即是θ双向复制，λ噬菌体的早期复制也是θ双向复制。 第五十八页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA的复制方式 滚环复制 λ噬菌体DNA的后期复制即是此种方式。 第五十九页，共一百零八页，2022年，8月28日 先以轻链为模板复制一条重链，而原来的亲本重链被置换出来称为D loop。当D loop扩大到整个线粒体DNA的大约67%的位置时，被置换出来的亲本重链上的轻链复制原点OL才暴露出来，然后开始轻链的合成。 DNA的复制方式 D环复制 最典型的D环复制是哺乳动物线粒体DNA的复制。在环状双链DNA的特定位点即重链的复制原点OH附近，解开双链，形成一个复制泡。 第六十页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA的复制方式 2D环 第六十一页，共一百零八页，2022年，8月28日 复制叉处的半不连续合成 旧链 复制叉行进方向 随从链 前导链 新DNA链合成的方向必须是5’→3’ 第六十二页，共一百零八页，2022年，8月28日 随从链的合成方式 (a) 以DNA为模板 合成RNA引物 RNA引物 随从链模板 (b) 在引物的3’端 合成新的DNA 新DNA 冈崎片段 (c) DNA聚合酶去除 引物并填补空隙 (d) DNA连接酶 使片段连接 连接 随从链也叫后随链 第六十三页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA复制叉处的结构 DNA ligase DNA polymeraseⅠ Old Okazaki fragment Okazaki fragment Primer Lagging strand template Primer Helicase/primase Newly synthesized leading strand Dimeric replicative DNA polymerase βsubunit “ sliding clamp” SSB Leading strand template DNA gyrase Primer 第六十四页，共一百零八页，2022年，8月28日 岗琦片段的连接 DNA polymerase Ⅰ DNA ligase 第六十五页，共一百零八页，2022年，8月28日 原核生物和真核生物的冈崎片段 细菌的冈崎片段长度为1000～2000个核苷酸，相当于一个顺反子（cistron）的长度；真核生物的冈崎片段长度为100～200个核苷酸，相当于一个核小体DNA的长度。 第六十六页，共一百零八页，2022年，8月28日 E.coli 的主要复制蛋白 第六十七页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA复制的最基本条件 单链DNA模板 DNA聚合酶 引物（RNA或DNA） dATP、dGTP、dCTP、dTTP (简称 4×dNTP） 必要的无机离子(Mg2+、K+） 第六十八页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA的反转录合成 （RNA-directed DNA polymerase，RDDP） （DNA-dirceted DNA polymerase，DDDP） 第六十九页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA的人工反转录合成 第七十页，共一百零八页，2022年，8月28日 引起DNA损伤的因素 DNA合成时碱基错配 电离辐射 紫外线照射 化学诱变剂 致癌病毒 第七十一页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA的损伤类型 DNA的突变类型 点突变 缺失突变 插入突变 置换突变 DNA的修复方式 光复活 切除修复 重组修复 SOS修复 DNA断链 DNA链内交联 DNA链间交联 第七十二页，共一百零八页，2022年，8月28日 DNA损伤的切除修复 第七十三页，共一百零八页，2022年，8月28日 第六节 RNA的生物合成 DNA指导的RNA合成（转录） RNA指导的RNA合成（复制） 第七十四页，共一百零八页，2022年，8月28日 转录体系的组成 DNA模板 ATP、GTP、CTP、