核酸的生物合成 (10).pptVIP

二、RNA的生物合成 蛋白质 翻译 转录 逆转录 复制 复制 DNA RNA 中心法则示意图 ？ 第六十三页，共九十六页，2022年，8月28日 转录是在DNA指导的RNA聚合酶催化下，按照碱基互补配对的原则，以4种NTP为底物，不需要引物，连续合成出一条与DNA一条链互补的RNA的过程。 转录起始于DNA的特定位点，并在一定位点处终止，此转录区域称为转录单位。 转录方向 - 5’-3’ 转录起始 - 启动子区控制 转录终止 - 终止子区控制 1.转录(transcription) 第六十四页，共九十六页，2022年，8月28日 第六十五页，共九十六页，2022年，8月28日 模板链/反义链/负（-）链 编码链/有义链/正（+）链 编码链上转录起点标记为+1，上游标记为负，下游标记为正 1.1 不对称转录 第六十六页，共九十六页，2022年，8月28日 1.2 RNA聚合酶 第六十七页，共九十六页，2022年，8月28日 大肠杆菌的RNA聚合酶结构复杂,全酶由5个亚基构成α2ββ’ ωσ ，还含有两个Zn2+。 α2ββ’为核心酶。 NTP结合部位 DNA模板 结合部位 β亚基结合位点 带领核心酶识别启动子 可能参与各亚基组装成RNA聚合酶 第六十八页，共九十六页，2022年，8月28日 1.3 转录过程 转录过程分为起始、延伸、终止。 第六十九页，共九十六页，2022年，8月28日 识别：RNA聚合酶与启动子的结合，DNA链的局部打开。 起始：DNA模板和RNA碱基配对 第一个核苷酸通常是ATP或GTP ①RNA合成的起始 第七十页，共九十六页，2022年，8月28日 第七十一页，共九十六页，2022年，8月28日 ②RNA链的延伸 RNA聚合酶是沿DNA链 3’→5’方向移动 RNA链合成方向也是 5’→3’ RNA聚合酶缺乏核酸外切酶活性，即缺乏校对功能 第七十二页，共九十六页，2022年，8月28日 ③RNA合成的终止 基因转录终点-终止子(terminator) 终止子是基因末端终止转录的特殊信号序列。 RNA聚合酶和新合成的RNA从DNA上脱落。 第七十三页，共九十六页，2022年，8月28日 不依赖于蛋白质因子而实现的终止作用，核心酶本身即可终止转录； 依赖蛋白质辅因子(称为释放因子，即ρ因子)才能实现终止作用。 原核生物的转录终止子有两种类型： 第七十四页，共九十六页，2022年，8月28日 不依赖ρ因子的终止 不依赖ρ因子的终止子 ( 强终止子 ) 有一富含G-C的二重对称区，其下游有6～8个T； 由这段DNA转录产生RNA容易形成发荚结构；并导致转录3’端为寡聚U。这两种结构特征决定了转录的终止。 第七十五页，共九十六页，2022年，8月28日 不依赖ρ因子的终止 第七十六页，共九十六页，2022年，8月28日 依赖ρ因子的终止 依赖ρ因子的终止子(弱终止子)中G-C碱基对含量较少，转录生成的RNA也可形成二级结构为发夹结构，这样的结构可能阻碍了RNA聚合酶进一步发挥作用。无寡聚U。 第七十七页，共九十六页，2022年，8月28日 第七十八页，共九十六页，2022年，8月28日 1.4 RNA的转录后加工 第七十九页，共九十六页，2022年，8月28日 第八十页，共九十六页，2022年，8月28日 1.5 真核生物中的转录 ①真核生物中转录与翻译处在在不同的区域 ②真核生物有多种RNA聚合酶 ③真核生物启动子与原核生物不同 ④转录后加工修饰不同 第八十一页，共九十六页，2022年，8月28日 第三十一页，共九十六页，2022年，8月28日 1.4.1 复制的起始 复制起点（Origin of replication，Ori） 复制泡（replication bubble） 复制叉（Replication fork） 复制子（Replicon,复制单元）—DNA复制的功能单位，一个复制子只含一个专一复制起点和复制结束的终点。一个完整的复制子在一个细胞周期中只复制一次。细菌病毒和线粒体只有单一复制子。真核生物染色体则有多个复制子组成。 第三十二页，共九十六页，2022年，8月28日 第三十三页，共九十六页，2022年，8月28日 大肠杆菌复制的起点由245个bp构成，其序列很保守，有两组短的重复： 3个13 bp的序列和4个9 bp的序列 第三十四页，共九十六页，2022年，8月28日 20个DnaA结合在四组9bp重复区，形成起始复合物，DNA环绕此复合物。 三组13bp重复区依次变性，产生开放型复合物。 解螺旋酶（DnaB）在DnaC协助下与开放复合物结合，进一步解链。 解链时带来的扭