核酸的生物合成 (7).pptVIP

1. 复制的起始 起始：当DNA的双螺旋解开后，合成RNA引物的过程。 引发体：引物合成酶与各种蛋白质因子构成的复合体，负责RNA引物的合成。引发体沿着模板链5’→3’方向移动（与冈崎片段合成的方向正好相反，而与复制叉移动的方向相同），移到一定位置上即可引发RNA引物的合成。 （1）DNA解旋、解链、形成复制叉； （2）RNA引物合成。 第三十一页，共五十二页，2022年，8月28日 引物酶合成RNA引物 第三十二页，共五十二页，2022年，8月28日 2.复制的延伸 复制体：在DNA合成的生长点（既复制叉上）分布着许多与复制有关的酶和辅助因子，它们在DNA的模板链形成离散的复合物，彼此配合进行高度精确的复制，称为复制体。复制体沿着复制叉方向前进就合成DNA。 （1）子链延长； （2） 半不连续合成。前导链只需要一个RNA引物，后随链的每一个冈崎片段都需要一个RNA引物，链的延长反应由DNA pol.Ⅲ催化。 第三十三页，共五十二页，2022年，8月28日 半不连续复制 第三十四页，共五十二页，2022年，8月28日 DNA聚合酶延长子链 第三十五页，共五十二页，2022年，8月28日 （3）RNA引物的切除及缺口补齐DNA polⅠ的5‘ → 3’外切酶活性，切除RNA引物。DNApolⅠ的5‘ → 3’聚合酶活性补齐缺口 （4）DNA切口的连接DNA ligase，动物、真核由ATP供能，原核由NAD+供能。3. DNA合成的终止 环状DNA、线性DNA，复制叉相遇即终止。 第三十六页，共五十二页，2022年，8月28日 DNA的复制过程 第三十七页，共五十二页，2022年，8月28日 关于核酸的生物合成 (7) 第一页，共五十二页，2022年，8月28日 遗传信息传递的中心法则 蛋白质 翻译 转录 逆转录 复制 复制 DNA RNA 生物的遗传信息以密码的形式储存在DNA分子上，表现为特定的核苷酸排列顺序。在细胞分裂的过程中，通过DNA复制把亲代细胞所含的遗传信息忠实地传递给两个子代细胞。在子代细胞的生长发育过程中，这些遗传信息通过转录传递给RNA，再由RNA通过翻译转变成相应的蛋白质多肽链上的氨基酸排列顺序，由蛋白质执行各种各样的生物学功能，使后代表现出与亲代相似的遗传特征。 后来人们又发现，在宿主细胞中一些RNA病毒能以自己的RNA为模板复制出新的病毒RNA，还有一些RNA病毒能以其RNA为模板合成DNA，称为逆转录这是中心法则的补充。 第二页，共五十二页，2022年，8月28日 中心法则总结了生物体内遗传信息的流动规律，揭示遗传的分子基础，不仅使人们对细胞的生长、发育、遗传、变异等生命现象有了更深刻的认识，而且以这方面的理论和技术为基础发展了基因工程，给人类的生产和生活带来了深刻的革命。 第三页，共五十二页，2022年，8月28日 一、DNA的半保留复制的概念 DNA在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶的催化下按碱基互补的原则合成两条与模板链互补的新链，以组成新的DNA分子。 这样新形成的两个DNA分子与亲代DNA分子的碱基顺序完全一样。由于子代DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制。 第一节 DNA的生物合成 第四页，共五十二页，2022年，8月28日 T2 Genomic DNAsingle linear DNA (about 182,000 bp) 第五页，共五十二页，2022年，8月28日 Old strand New strand The hypothesis of semiconservative replication proposed by Watson and Crick in 1953. 第六页，共五十二页，2022年，8月28日 DNA的半保留复制实验 Meselson stahl用同位素示踪标记加密度梯度离心技术实验,证明了DNA是采取半保留的方式进行复制. 第七页，共五十二页，2022年，8月28日 复制中的大肠杆菌染色体放射自显影图(Caims实验：阐明了大肠杆菌染色体DNA是一环状分子，并以半保留方式进行复制) 用3H-胸苷标记大肠杆菌DNA，经过近两代的时间，3H-胸苷掺入大肠杆菌DNA 。用溶菌酶把细胞壁消化掉，使完整的大肠杆菌染色体DNA释放出来，放射自显影，得到上图。非复制部分（C）银粒子密度较低，由一股放射性链和一股非放射性链构成。已复制部分占整个染色体的三分之二，其中一条双链（ B ）仅有一股链是标记的，另外一股双链（ A ）的两股链都是标记的，银粒子密度为前二者的两倍。染色体全长约为1100微米。