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真核细胞mRNA的加工(P476) 5′端接上一个“帽子”(CAP)结构 3′端添加PolyA“尾巴”,由RNA末端核苷酸转移酶催化 mRNA的内部甲基化,N6-甲基腺嘌呤(m6A) 剪接:剪去内含子(intron),拼接外显子(extron) 第三十一页,共五十七页,2022年,8月28日 5′ “帽子” PolyA 3′ 顺反子(cistron ) m7G-5′ppp-N-3 ′ p AAAAAAA-OH 第三十二页,共五十七页,2022年,8月28日 第三十三页,共五十七页,2022年,8月28日 EM studies of mRNA-DNA hybrids for the chicken ovalbumin gene (the R-looping technique) 第三十四页,共五十七页,2022年,8月28日 Processing of eukaryotic mRNA 第三十五页,共五十七页,2022年,8月28日 第三十六页,共五十七页,2022年,8月28日 (二)RNA的拼接、编辑和再编码 大多数的真核基因都是断裂基因,断裂基因的转录产物需要通过拼接,去除插入部分(即内含子,intron),使编码区(即外显子,Exon)成为连续序列,这是基因表达的一个重要环节。RNA编码序列的改变称为编辑( editing), RNA编码和读码方式的改变称为再编码(recoding)。由于存在选择性的拼接、编辑和再编码,一个基因可以产生多种蛋白质。 第三十七页,共五十七页,2022年,8月28日 降钙素基因相关蛋白 降钙素 第三十八页,共五十七页,2022年,8月28日 RNA的拼接方式 ? 类型I自我拼接 ? 类型II自我拼接 ? 核mRNA的拼接体的拼接 ? 核mRNA的酶促拼接 第三十九页,共五十七页,2022年,8月28日 (三)RNA生物功能的多样性(P489) 1. RNA在遗传信息的翻译中起着决定作用。 2. RNA具有重要的催化功能和其他持家功能。 3. RNA转录后加工和修饰依赖于各类小RNA和其他蛋白质复合物。 4. RNA对基因表达和细胞功能具有重要调节作用。 5. RNA在生物进化中起重要作用。 第四十页,共五十七页,2022年,8月28日 (四)RNA的降解 RNA降解是涉及到基因表达的一个重要环节, rRNA和tRNA是稳定的RNA ,其更新率低; mRNA是不稳定的RNA,其更新率非常高。因为mRNA与其编码基因的表达活性直接有关,不同的RNA需要以不同的速度进行降解。 Average half lives of mRNA molecules Bacteria 1.5 minutes Vertebrates 3 hours 第四十一页,共五十七页,2022年,8月28日 关于核酸的生物合成 第一页,共五十七页,2022年,8月28日 一、 DNA指导下RNA的合成 (一)转录的概念 (二) RNA聚合酶及催化反应 (三) RNA合成过程 (四)启动子和转录因子 (五)终止子和终止因子 第二页,共五十七页,2022年,8月28日 DNA和RNA合成的异同 基本化学机制相同:两者都由模板指导;链的延伸都有极性,即5′向3′方向;两者都用核苷5 ′-三磷酸(dNTP 或NTP)为原料。 不同方面:不需要引物;只涉及大的DNA分子中一段;只用互补双链DNA中的一条链为模板;无纠错功能。 第三页,共五十七页,2022年,8月28日 (一)转录的概念 转录是在 DNA的指导下在RNA聚合酶的催化下,按照碱基配对的原则,以四种核苷酸为原料合成一条与模板DNA互补的RNA 的过程。RNA的转录从DNA模板的特定位点开始,并在一定的位点终止。此转录区域为一个转录单位。 启动子promoter 终止子(terminator) 模板链(template strand) 反意义链(antisense strand) 有意义链(sense strand) 非信息区 DNA 5′ 5′ 3′ 3′ 第四页,共五十七页,2022年,8月28日 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 ? ? ? ? ?? 核心酶(α2ββ?) 起始因子 β?——和模板DNA结合 β——起始和催化聚合反应 α——酶的装配与启动子上游元件和活化因子结合 全酶(αββ? ?) (二)RNA聚合酶及催化的反应 第五页,共五十七页,2022年,8月28日 The E. coli RNA polymerase holoenzyme consists of six subunits: a2bb’? s.
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