甲基莲心碱通过阻断ROCK通路抑制非小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭.pdfVIP

甲基莲心碱通过阻断ＲＯＣＫ通路抑制 非小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭 －１ 甲基莲心碱实验组剂量确定为４、６ 和１０ μｍｏｌ ·Ｌ 。 这３ 种浓度Ｎｅｆ对Ｈ１２９９肺癌细胞的迁移和侵袭均有一定的抑 制作用，且呈现浓度依赖性；同时Ｎｅｆ 下调与这种癌细胞迁 移、侵袭有关的ＭＭＰ⁃２、ＭＭＰ⁃９ 和 ＲＯＣＫ１蛋白表达；另外， 摘要：目的　 验证甲基莲心碱（ｎｅｆｅｒｉｎｅ，Ｎｅｆ）通过阻断ＲＯＣＫ Ｎｅｆ与ＲＯＣＫ１的亲合力明显大于 ＲＯＣＫ抑制剂法舒地尔， 通路对非小细胞肺癌 Ｈ１２９９ 细胞迁移和侵袭的抑制作用。 且与ＲＯＣＫ１的Ａ链结合力更强。 结论　 Ｎｅｆ作为一种潜在 方法　 取 Ｈ１２９９ 细胞体外培养，经不同浓度的Ｎｅｆ 处理， 的抗癌天然化合物，通过下调与肿瘤细胞迁移和侵袭相关分 ＣＣＫ⁃８法检测Ｈ１２９９细胞活力确定实验组浓度。 细胞划痕、 子ＭＭＰ⁃２、ＭＭＰ⁃９ 和ＲＯＣＫ１ 的表达，进而发挥抑制非小细 Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室实验检测 Ｈ１２９９ 细胞的迁移和侵袭能力，酶 胞肺癌细胞迁移和侵袭的作用。 联免疫吸附法检测肺癌细胞分泌的基质金属蛋白ＭＭＰ⁃２、 ＭＭＰ⁃９ 的表达，实时荧光定量 ＰＣＲ 和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 法检测 关键词：非小细胞肺癌；Ｈ１２９９细胞；甲基莲心碱；抗肿瘤；迁 Ｈ１２９９细胞ＲＯＣＫ１蛋白水平；应用ＡｕｔｏＤｏｃｋ半柔性对接方 移；侵袭；ＲＯＣＫ１抑制剂 法模拟了Ｎｅｆ 与 ＲＯＣＫ１之间的结合模式和亲合力。 结果 　 　 肺癌仍然是全世界癌症死亡的主要原因，来自 ＷＨＯ 国际癌症研究机构的最新数据表明，２０２０ 年 的肺癌发病人数虽居第２ 位，但仍然是“第一癌症 杀手”；且在中国高发癌种和病死人数第一位的仍 是肺癌。 非小细胞肺癌（ｎｏｎ⁃ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏ⁃ ｍａ，ＮＳＣＬＣ）约占所有肺癌的８５％。 大多数 ＮＳＣＬＣ Ｍｅｔｈｏｄｓ　 Ｆｉｒｓｔ，ｔｈｅ ＩＲｍｏｄｅｌ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓｗａｓ ｍｏｓｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｍｏｎｇｔｈｅ ｓｉＲＮＡｓ． Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅｆｕｒ⁃ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ ＨＧ／ ＨＦ ｓｔｒｅｓｓ． Ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｘｐｒｅｓ⁃ ｔｈｅｒ ｓｔｕｄｙ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｔｈｅ Ｆｏｘｏ６ ｇｅｎｅ ｃｏｕｌｄ ｓｉｏｎ ｏｆ Ｆｏｘｏｓ ｇｅｎｅ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ （Ｃｔｒｌ ） ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ＨＧ／ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｒｅｖｅｒｓｅｔｈｅｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＩＲｉｎｄｕｃｅｄｂｙ ＨＧ／ ＨＦ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ， ａｎｄ ｔｈｅ ｓｕｂｔｙｐｅｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ＨＦ，ａｎｄｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈｅｒｅｖｅｒｓａｌｅｆｆｅｃｔｗａｓｒｅｌａｔ⁃ ｍｏｓｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ