治疗自身免疫性疾病的新靶标及相关新药研发.ppt

ADWX-1与Kv1.3通道作用的分子机制 在ADWX-1和Kv1.3通道的相互作用中， ADWX-1 中的Arg23， Phe24 和Lys26是最重要的功能氨基酸残基。 Arg23，Lys26和Kv1.3的相互作用 Phe24和Kv1.3的相互作用 Arg23， Phe24 ，Lys26和Kv1.3的相互作用 有机小分子和多肽调节剂的比较 有机小分子correolide与Kv1.3通道的相互作用 多肽KTX与Kv1.3通道的相互作用 Kv1.x通道序列比对、通道模型及药物分子作用区域示意图 小分子和多肽作用 Kv1.3通道的示意图 与有机小分子药物相比，多肽调节剂具有更好的选择性和特异性。 细胞内 小分子 多肽 钾 通 道 治疗自身免疫疾病的新靶标：钾通道Kv1.3 钾通道Kv1.3结构示意图 TEM细胞的异常增殖在自身免疫疾病中起重要的作用，钾通道Kv1.3成为了治疗自身免疫疾病的一个新的药物靶标。 治疗自身免疫性疾病的新靶标：Kv1.3通道 靶向Kv1.3通道的先导药物研发 靶向Kv1.3先导药物在预防和治疗自身免疫疾病中的应用 有机小分子调节剂的筛选与设计 靶向钾通道Kv1.3的药物研发 多肽调节剂的筛选与设计 有机小分子调节剂的筛选与设计 1998年，Merck公司就分离到correolide，它能在100nM水平上抑制T细胞的增殖。随后Merck、Pfzer等研发机构分离、合成、和功能鉴定了10多种有机小分子药物候选物。 有机小分子先导药物的不足： 作用于Kv1.3钾通道的选择性和特异性不强 有机小分子的药理学活性 有机小分子调节剂的筛选与设计 多肽调节剂的筛选与设计 自然界中的有毒动物 多肽药物的筛选与设计 以蝎毒肽为基础的多肽药物筛选与设计 以海葵毒素为基础的多肽药物筛选与设计 海葵毒素多肽药物的研发 选择性较好的SL5多肽药理学活性 海葵毒素Shk 海 葵 多肽调节剂的筛选与设计 自然界中的有毒动物 多肽药物的筛选与设计 以蝎毒肽为基础的多肽药物筛选与设计 以海葵毒素为基础的多肽药物筛选与设计 以蝎毒肽为基础的药物研发 作为天然的毒素资源库，蝎毒肽比海葵毒素更丰富。 蝎 作用于钾离子通道的蝎毒肽 如何获得对钾通道Kv1.3高选择性和特异性的多肽调节剂？ 从蝎毒肽中天然分离 以蝎毒肽为模板进行设计和改造 天然的蝎毒肽包含多种作用于Kv1.3通道的成员，但选择性和特异性普遍不高。 ImKTx88的筛选和序列分析 从海南斑等蝎（Isometrus maculates）毒腺组织cDNA文库中筛选出钾通道蝎毒肽ImKTx88基因。 天然蝎毒肽调节剂的筛选 多肽ImKTx88的表达纯化和质谱鉴定 2005年，法国科学家Jean-Marc等改造蝎钾毒素多肽OSK1获得了特异作用于Kv1.3通道的多肽AOSK1。 以蝎毒肽为模板的多肽调节剂设计和改造 AOSK1及其突变体对Kv1.3的特异性和选择性比较 2008年，武汉大学依据已建立的多种蝎毒腺cDNA文库，结合蝎毒肽的结构与功能研究，设计筛选获得了选择性和特异性作用于Kv1.3通道的多肽ADWX-1。 靶向钾通道Kv1.3先导药物多肽ADWX-1的筛选 α-KTx3亚家族蝎毒肽序列比对 BmKTX结构 蝎毒肽和Kv1.x钾通道作用模式 先导药物多肽ADWX-1的设计 先导药物多肽ADWX-1的设计 ADWX-1和BmKTX的序列比对及其和Kv1.3通道作用 ADWX-1和rBmKTX的圆二色谱比较 ADWX-1和BmKTX的NMR结构比较 ADWX-1多肽的表达纯化 Peptide Channels and cells tested Kd-IC50 xm (nM) Specificity Index xm/cn n=Kv1.3 Charybdotoxin hKv1.3 Tlymph rKv1.1 oocyte rKv1.2 B82 3.5 999 10 1 100 2.9 Kaliotoxin rKv1.3 oocyte mKv1.1 oocyte mKv1.2 oocyte 0.41 1.1 25 1 2.7 61 OSK1[P12,K16,D20] mKv1.3 mKv1.1 COS hKv1.2 COS 0.059 3.18 100 1 54 1000 Anuroctoxin hKv1.3 Tlymph hKv1.1 L929 hKv1.2 COS 0.73 100 6.1 1 100 8.34 ShK(L5) hKv1.3 Tlymph mKv1.1 rKv1.2 B82 0.076 7.0 48 1 92 100 ADWX-1 mKv1.3 HEK