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G蛋白与信号转导会计学第1页/共53页【目的要求】1．掌握G蛋白、小G蛋白的概念；G蛋白基本结构。2．熟悉G蛋白的种类；G蛋白通过AC和PLC的信号转导机制。3．了解G蛋白的发现和意义；G蛋白通过某些受体门控离子通道和cGMP-PDE的信号转导机制；小G蛋白的特点。 　第2页/共53页　G 蛋白：　是鸟苷酸结合蛋白（guanosine nucleotide-binding protein）的简称，是指能与 GTP 或 GDP 结合，与膜受体偶联而具有信号转导作用的蛋白质。　　一、G 蛋白概况　第3页/共53页（一）G 蛋白的发现和意义　Rodbell 等在 20 世纪 70 年代发现跨膜信号转导需要 GTP 存在。　1977年，Gilman发现了G蛋白。　1981年，Gilman纯化了G蛋白。　1994年，Gilman 和 Rodbell 获医学和生理学诺贝尔奖。　第4页/共53页　吉尔曼（Alfred G. Gilman）1941.7.1~ 德克萨斯大学西南医学中心药学系 第5页/共53页　发现G 蛋白的意义：　它揭示了细胞外信号如何转换为细胞内信号的真正机制，从而开辟了细胞信号跨膜转导研究的新时代。　第6页/共53页　G 蛋白：　与细胞膜受体偶联的G蛋白由3个不同的亚基组成，又称为异三聚体G蛋白。　小G蛋白：　分散在细胞内有类似G蛋白作用的单体蛋白，因分子量小而得名。如ras表达产物。 　　第7页/共53页（二）G蛋白基本结构　位于细胞膜的胞浆侧。　　第8页/共53页　G蛋白由三个亚基组成：　G?：39~46kD，20多种，有GTP或GDP结合位点、GTP酶活性、ADP核糖基化位点、毒素修饰位点及受体和效应器结合位点等。　G?：36kD，6种。　G? ：7~8kD，10多种。　　第9页/共53页　G蛋白有两种构象形式：　活化型：G?与GTP结合，与G? ?分离。　非活化型：G?与GDP结合，与G? ?结合成三聚体。 　　第10页/共53页　活化型非活化型　第11页/共53页（三）G蛋白的种类　1. Gs型G蛋白　激活AC，激活钙通道，抑制钠通道。　2. Gi型G蛋白　抑制AC，抑制钙通道，活化钾通道、PLC和PLA2。 　第12页/共53页　Gs型与Gi型G蛋白的作用　　第13页/共53页　　第14页/共53页　3. Gt型G蛋白　分布在视网膜的感光细胞，与视紫红质结合，激活cGMP-PDE，传递光反应冲动。　　　　第15页/共53页　4. Gg 、 Go 及 Gq 型 G 蛋白 Gg 是味蕾组织中的一种 G 蛋白，与味觉的信号转导有关。 Go 存在于脑组织中，能调节磷脂代谢，可能与肌醇磷酸信号转导有关。 Gq 与磷脂代谢有关，其活性不受细胞毒素的修饰。　第16页/共53页　5. G 蛋白的βγ亚基　活化的βγ亚基复合物也可直接激活胞内靶分子，具有传递信号的功能。如心肌细胞中G蛋白偶联受体在乙酰胆碱刺激下，活化的βγ亚基复合物能开启质膜上的K+通道，改变心肌细胞的膜电位。二、G 蛋白信号转导机制　第17页/共53页（一）G 蛋白通过 AC 的信号转导机制　1.　信号分子结合改变受体构象；　2.　受体与 G 蛋白结合并使其激活；　3.　GTP 取代 GDP，G? 游离；　4.　G? 结合并激活 AC，产生 cAMP；　5.　GTP 水解， G? 与 ?? 再结合。　 　第18页/共53页　 　第19页/共53页 　第20页/共53页　Gs型G蛋白的?亚基通过与受体和AC的结合和解离达到信号跨膜传递的介导和终止，GDP与GTP的互变起触媒作用。　实验一、用非水解GTP类似物GMP-P(NH2)P代替GTP。　 　第21页/共53页　实验二、霍乱毒素（cholera toxin）实验　　霍乱毒素能催化ADP核糖基共价结合到Gs的?亚基上，致使?亚基丧失GTP酶的活性，使?亚基处于持续活化状态，腺苷酸环化酶永久性活化。导致霍乱病患者细胞内Na+和水持续外流，产生严重腹泻而脱水。　第22页/共53页ADP-ribosylation Gs?22-kD subunit of cholera toxin腺苷腺苷NicotinamideNAD+ 　第23页/共53页　百日咳毒素（Pertussis toxin）作用　　百日咳毒素能催化Gi? 发生ADP核糖基化，致使?亚基的GTP与GDP交换抑制，使?亚基处于持续非活化状态，因此不能抑制AC，使cAMP浓度升高。导致患儿阵发性痉挛性咳嗽，即百日咳(whooping cough)。　第24页/共53页（二）G蛋白通过某些受体门控离子通道的信号转导机制　　　神经递质受体cAMPPKAG蛋白AC离子通道　第25页/共53页　Molecule of transmitter substance