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QDNA生物合成之一会计学第1页/共45页 目 录第一节 DNA的复制（DNA指导下的DNA合成）第二节 DNA的损伤与修复第2页/共45页目的要求1.掌握遗传信息传递的中心法则。2.掌握DNA复制的一般规律：DNA的半保留复制、DNA的半不连续复制的概念。 3.?了解三种大肠杆菌DNA聚合酶的催化特性及其功用；了解原核生物DNA的复制过程。4.?了解使DNA损伤的因素；DNA损伤的修复机制：碱基切除修复、直接修复、重组修复及光修复的过程及所需要的酶类；了解DNA损伤修复的意义。复制复制DNADNA转录逆转录RNA蛋白质翻译复制第3页/共45页中心法则1964-1970 发现劳氏肉瘤病毒的遗传信息传递方式：逆转录。1958年，Crick提出中心法则：遗传信息的单向流动。复制DNA第4页/共45页几个基本概念 复制：以亲代DNA或RNA为模板，根据碱基配对的原则，在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 转录：以DNA为模板，按照碱基配对原则合成RNA，即将DNA所含的遗传信息传给RNA，形成一条与DNA链互补的RNA的过程。 翻译：亦叫转译，以mRNA为模板，将mRNA的密码解读成蛋白质的氨基酸顺序的过程。 逆转录：以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，生成DNA的过程。Reverse transcription第5页/共45页中心法则总结了生物体内遗传信息的流动规律，揭示遗传的分子基础。中心法则图示第6页/共45页本章主要内容一、DNA半保留复制的机理二、DNA的复制规律三、原核细胞DNA的复制过程四、DNA复制的忠实性五、真核细胞DNA的复制第7页/共45页一、DNA半保留复制的机理RNA引物n1dATPn2dGTPn3dCTPn4dTTPDNA模板DNA+（n1+n2+n3+n4)PPiDNA聚合酶Mg2+ Mn2+第8页/共45页二、DNA的复制规律(一）、半保留复制1、概念 以亲代DNA双链为模板，以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。第9页/共45页2、DNA的半保留复制实验依据 1958年，Meselson stahl用同位素N15标记大肠杆菌DNA,证明了半保留复制.第10页/共45页3、DNA的半保留复制的生物学意义 DNA的半保留复制表明：DNA在代谢上的稳定性，是保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代必要措施。 DNA在代谢上的稳定性并非指DNA是一种惰性物质。第11页/共45页（二）、DNA复制的主要方式在特定的部位开始，单向或双向进行。原核生物（细菌、病毒）：一个复制起点，双向复制为主，也有单向（某些质粒等）。 真核生物：多个复制起点，双向复制为主，也有单向（细胞器DNA）。第12页/共45页双向复制单向复制第13页/共45页（三）、复制需要RNA引物。（四）、子链DNA延伸方向：5 →3方向 引物上核糖的3 -OH能与其它的核苷酸的磷酸以3 ，5磷酸二酯键相连。第14页/共45页（五）、DNA复制的半不连续性前导链：以3’ → 5’ 方向的亲代链为模板连续合成的子代链。前导链冈崎片段滞后链：以5’ →3’方向的亲代链为模板的子代链先逆复制叉移动方向合成冈崎片段，再连接成滞后链。滞后链3′5′解旋酶解链酶引物酶和引发体SSBRNA引物DNA聚合酶IIIDNA聚合酶I3′3′5′5′RNA引物第15页/共45页（六）、原核生物DNA聚合反应有关的酶类（1）DNA聚合酶(DNA polymetases)（2）拓扑异构酶(topoisomerase) (3）引物酶(peimase)和引发体(primosome)（4）DNA解链酶(DNA helicase) (5）单链结合蛋白(single-strand binding protein,SSB) (6） DNA连接酶（DNA ligase）3′3′5′5′3′5′5′3′第16页/共45页DNA聚合酶第17页/共45页大肠杆菌三种DNA聚合酶比较DNA聚合酶ⅡDNA聚合酶ⅢDNA聚合酶Ⅰ比较项目109，000400+++1400，00010-20++-50分子量每个细胞的分子统计数5′-3 ′聚合酶作用3′-5 ′核酸外切酶作用5′-3 ′核酸外切酶作用转化率120，000100++-0 .05分子量每个细胞的分子统计数5′-3 ′聚合酶作用3′-5 ′核酸外切酶作用5′-3 ′核酸外切酶作用转化率复制切除引物修复功能功能修复 1999年发现聚合酶? 和?，它们涉及DNA的错误倾向修复（errooune repair）5′3′5′3′- 5′核酸外切酶水解位点第18页/共45页DNA聚合酶3′- 5′外切酶活力错配碱基3′5′单链缺口5′-