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上海生物沪教等级考动物细胞工程 植物细胞工程动物细胞工程植物体细胞杂交/细胞融合技术植物组织培养技术1、动物组织和细胞培养技术 2、动物细胞融合技术3、动物细胞核移植技术4、动物胚胎移植技术5、干细胞技术细胞工程类型 6、动物克隆技术√√√√第1页/共25页 去核卵细胞细胞核移植技术体细胞的核重组细胞早期胚胎代孕羊子宫克隆羊动物组织和细胞培养技术胚胎移植技术动物克隆过程：证明动物的体细胞的核具有全能性采用卵细胞的原因：①卵细胞体积大易操作；②可能含有促进分化的物质如何把体细胞的核移植到去核卵细胞中？显微注射法第2页/共25页 一、动物组织和细胞培养1、概念：动物组织和细胞培养是从动物体内分离出组织或细胞，在无菌、适宜的温度和营养条件下，使组织或细胞生长和繁殖的一门技术。第3页/共25页 2、过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶细胞培养单个细胞加培养液动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）细胞或细胞产物第4页/共25页 3. 应用 （1）培养健康细胞，用于临床治疗如：皮肤移植（2）生产蛋白质等生物制品如：病毒疫苗、抗体、酶等（3）细胞的生理、药理、病理研究如：体外培养的癌细胞进行 实验，提取抗癌药物 第5页/共25页 4. 条件（1）无菌环境 （2）营养:（3）温度和PH（4）有氧环境 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清第6页/共25页 二、动物细胞融合思考：动物正常的生命活动中有细胞融合的过程吗？ 受精作用第7页/共25页 细胞A细胞B杂种细胞生物法物理法化学法灭活的仙台病毒电刺激等聚乙二醇第8页/共25页 三、单克隆抗体 （动物细胞融合最有价值的成就）B淋巴细胞特点:骨髓瘤细胞特点:能产生特异性抗体,但不能在体外无限增殖能无限增殖,但不能产生特异性抗体杂交瘤细胞特点：既能产生单一抗体，又能在体外无限增殖第9页/共25页 1、单克隆抗体(可特异性消灭某种抗原)制备过程 注射某一种抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞体外培养单克隆抗体为什么要注射某抗原？为获得能产生某特异性抗体的B淋巴细胞为什么筛选？细胞融合后培养液中有几种细胞？B BB B瘤 瘤瘤 瘤√因为老鼠体内不可能只有一种B淋巴细胞第10页/共25页 2、单克隆抗体的概念：由单个杂交瘤细胞增殖产生的杂交瘤细胞群持续分泌的成分单一的特异性抗体。3、单克隆抗体的特点：特异性强；灵敏度高（纯度高）第11页/共25页 4、单克隆抗体的应用：用于疾病的诊断和治疗如：?鉴定和区分各种抗原； ?制成“生物导弹(单克隆抗体+药物)”， 治疗癌症。第12页/共25页 1. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞　②小鼠骨髓瘤细胞　③B淋巴细胞自身融合细胞　④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　⑤杂交瘤细胞A． ②④ B．①③⑤　　C． ①②③④ 　 D．②③ C第13页/共25页 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中B为________过程，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。1、该实验方案的目的是__________3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______制备单克隆抗体B淋巴细胞抗体细胞融合双亲细胞分泌抗体无限增殖B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC不能没有预先注射某一种抗原第14页/共25页 四、细胞核移植1、概念将一种细胞的细胞核移植另一种去核的细胞中的技术。 2、过程体细胞核去核卵细胞移植重组细胞组织培养胚胎移植幼体如何把细胞核移植到去核卵细胞中呢？P106：显微注射法第15页/共25页 3、应用创造出无性杂交的生物新品种。如：克隆羊、牛如：鲤鲫核质杂交鱼四、细胞核移植第16页/共25页 1.概念：将动物的受精卵或早期胚胎移植到母体子宫内，使之继续妊娠发育成新个体的技术.2、过程动物排卵体外受精胚胎母体子宫新个体培育移植超数排卵技术：五.动物胚胎移植注射促…激素第17页/共25页 3. 意义1)增加一生繁殖的后代数量2)保存品种资源和濒危物种胚胎分割移植：采用机械方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术.五.动物胚胎移植第18页/共