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- 2023-01-14 发布于中国
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;;(一)植物水孔蛋白的发现 ;约翰霍普金斯大学医学院的 Agre等 (1988) 在分离纯化红细胞膜上的Rh多肽时,发现了一个28?kD的疏水性跨膜蛋白,称为 形成通道的整合膜蛋白28(channel-forming integral?membrane?protein,CHIP28),1991年完成了其cDNA克隆。但当时并不知道该蛋白的功能。
Karl Windhage博士,将体外转录合成的CHIP28?cDNA注入非洲爪蟾的卵母细胞中,发现在低渗溶液中,卵母细胞迅速膨胀,并于5?min内破裂。
为进一步确定其功能,又将从红细胞中提取的高纯度的CHIP28蛋白整合到脂质体上,进行高渗处理,通过内部荧光物质的荧光变化来反映其体积的变化,与对照相比, CHIP28极大地增加了脂质体的透水性并 受到了氯化汞的可逆抑制,表现为很低的活化能,证实其为水选择性,并称CHIP28为Aquaporinl(AQPl)。?;表达AQPl非洲爪蟾的卵母细胞,表明AQPl在细胞膜上有水通道的功能。;;AQPl的发现后,短短几年内,在细菌、酵母、动物、植物中分离出许多水孔蛋白同源基因。
在植物中第一个水孔蛋白r-TIP是由Maure等(1993)从拟南芥中分离出来的。r-TIP的cDNA在爪蟾卵母细胞中的异源表达,证明它具有水分运输特性,属于植物水孔蛋白中的液泡膜内在蛋白(tonoplast-memb
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