临床基因扩增实验室的管理和质量保证.pptxVIP

会计学 1 临床基因扩增实验室的管理和质量保证 第一节 临床基因扩增检验实验室的设置 第1页/共22页 实验室设置原则： 各区独立 注意风向 因地制宜 方便工作 功能区设置： 1.试剂准备区 2.模板制备区 3.扩增区 4.产物分析区 各区必须有明确的标识 第2页/共22页 工作流向 试剂准备区 模板制备区 扩增区(产物分析区) 各区之间应有传递窗, 用于传递实验过程中的物品 第3页/共22页 第4页/共22页 阳性标本经扩增后的产物会成为后续实验扩增 的模板,对后续实验产生污染 必须注意空气流向（通过实验室的空气压力 而实现） 缓冲室：负压(用于更换工作衣和工作鞋) 实验室：常压 第5页/共22页 各功能区内设置相应的仪器和设备 模板制备区设生物安全柜 各功能区内的任何物品不可移至其它功能区 原则： 各功能区互相独立 设缓冲间, 保持区域间完全分隔 各区物品专用 第6页/共22页 临床基因扩增检验实验室必须经过国家有关部门的验收认可 必须遵循申报程序 第7页/共22页 （扫描程序） 第8页/共22页 第二节 临床基因扩增实验室的质量保证 第9页/共22页 室内质量控制 （internal quality control, IQC） 室间质量评价 （external quality assessment, EQA） 第10页/共22页 标本的采集、运送、保存及其质量控制 按检测要求建立标准操作程序和质量控制规则 第11页/共22页 标本采集和运送 采集时间 采集部位 采集材料（无菌、一次性使用） 标本类型（血清、血浆、有核细胞、分泌物、 脑脊液、尿液等） 标本质量（溶血 、脂血、其他物质污染） 抗凝剂（EDTA、 ACD） 运输容器和条件（无菌、密闭、可常温） 第12页/共22页 标本保存 尽快提取核酸 稳定剂（灭活RNase） 核酸的乙醇沉淀物可于-20°C保存 溶解于TE缓冲液中 核酸的长期保存应置于-80 °C 第13页/共22页 临床基因扩增检验的室内质量控制 第14页/共22页 分析前的质量控制 实验室的正确设置 仪器、设备的管理 试剂质量 人员培训 规范操作 第15页/共22页 分析中的质量控制 常规检测临床标本的同时，测定一份或连续测定数份含一定浓度分析物的质控样本，用统计学方法判断质控样本的检测结果是否偏出允许范围，进而决定常规标本检测结果的有效性。 （稳定可靠的质控品 切实可行的统计方法） 第16页/共22页 稳定可靠的室内质控物 质控样本的基质与待测样本一致 所含待测物浓度应接近试验的决定性水平 定性检测：检测的阳性判断值 定量检测：检测浓度范围的下、上限 稳定性、生物安全性 已知靶值或预期结果 单批量大、廉价 第17页/共22页 每次扩增必须设置监测污染发生的阴性质控 第18页/共22页 切实可行的统计方法 批间变异 最佳条件下的变异（OCV） 常规条件下的变异 ( RCV) 当RCV2倍或接近OCV时， RCV可被接受，即 批间变异可被接受。 第19页/共22页 批内变异 室内质控物测定准确度的评价 定量测定：批内和批间测定结果的均值与靶值 的差异 定性测定：弱阳性样本批内和批间测定结果 是否为阳性 质控物测定值的变异2S：可接受 质控物测定值的变异于2S~3S之间：警告 质控物测定值的变异 3S：失控 第20页/共22页 失控的可能原因 弱阳性质控样本 核酸提取过程中的随机误差 仪器 试剂 阴性质控样本 扩增产物的污染 核酸提取过程中标本间的交叉污染 第21页/共22页