实时荧光定量PCR技术及其应用(1).pdfVIP

实时荧光定量PCR 技术及其应用 摘要:实时荧光定量PCR 技术是在PCR 反应体系中加入荧光染料或荧光探针, 利用荧光信号积累实时监测整个PCR 反应进程,最后通过标准曲线对未知模板进行 定量分析,具有操作简便、快速高效,高通量,而且高敏感性等特点,该技术在分子诊 断、分子生物学研究、动植物检疫以及食品安全检测等方面有广泛的应用。文章对 实时荧光定量PCR 的原理、主要类型、优点、影响因素及应用等进行了综述。 关键词:实时荧光定量PCR 类型优点影响因素应用 实时荧光定量PCR 技术(real-time fluores-cence quantitative PCR, RTFQ PCR 是 1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新技术,它不仅实现了PCR 从定 性到定量的飞跃,而且与常规PCR 相比,具有灵敏度高、特异性强、有效解决PCR 污染问题、自动化程度高等特点。[1] 目前,该技术已广泛应用于分子生物学、医学 等学科和基础研究领域,特别是在现代农业转基因作物的定性检测、品系鉴定、转 基因成分含量的检测中发挥着重要作用[2]。 1 实时荧光定量PCR 技术的原理 实时荧光定量PCR 的原理是以荧光共振能量转移原理为基础。荧光共振能量 转移原理是当一个荧光分子(供体