遗传的制作和基因定位下.pptxVIP

会计学;??? 细菌中的大部分的转化工作是用下面三种细菌完成的：肺炎双球菌，枯草杆菌和流感嗜血杆菌。;②.供体DNA分子存在的数目：;㈡、转化DNA的摄取和整合过程：;第4页/共65页; (三)转化和基因重组作图 ;第6页/共65页;;　细菌的接合和基因定位;B菌株：Met+ bio+ thr- leu-， 需加苏氨酸和亮氨酸。;这种原养型细胞如何出现？ 转化？ 细胞间直接接触而发生遗传物质交换和重组?;⑴．F 因子：致育因子(性因子)，是一种附加体。;　F 因子的三种状态：;⑷．自主状态时;F因子整合到细菌染色体上(F＋ ? Hfr细胞)，其繁殖与细菌染色体同步进行。;细菌染色体由一小段单链的F因子为前导而转移到F-受体 ? 边进入边合成。一般情况下仅小部分细菌染色体能够转入，接合中断 ? 受体细胞仍为F－，F因子仍留在供体内。;部分二倍体中发生交换:;中断杂交作图;1955年Wollman和Jacob首次进行中断杂交实验： 供体菌：HfrH strs thr+ leu+ azis tons lac+ gal+ 受体菌： F- strr thr? leu- azir tonr lac- gal- 将大约10倍的F-菌与 Hfr对数期菌混合，轻轻振荡培养 在不同时间间隔取样，然后在组织搅拌中剧烈振荡,中断杂交 振荡后的培养物涂布于加了链霉素的基本培养基上 筛选不同于两个亲本的thr+ leu+ strr重组子 再对每一个重组子的非选择性标记azi ton lac gal 进行测定。 ;第19页/共65页;;第21页/共65页;（1）不同的非选择标记进入受体且重组的时间不同，但都是稳定的； （2）各基因的重组频率随着时间的增加而增加，直至极值； （3）按时间顺序，先重组和后重组的基因，重组率的极值在逐步减少；;该方法主要根据基因转移的先后次序，以时间为单位，求基因间的遗传距离。; 大肠杆菌染色体是环形的;细菌染色体为环状; 当转移时间间隔在两分钟之内， 如已知lac与ade紧密连锁，距离约为1分钟，中断杂交作图就不可靠，须用传统的重组作图(recombination mapping)。;1、 重组子的产生; 2、 重组频率的计算;3、大肠杆菌的遗传图谱;第30页/共65页;　细菌的转导和作画; LT22 phe- try- tyr-??????? ×?????LT2 met- his- （苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸）??? （甲硫氨酸、组氨酸） 营养缺陷型 ↓????? 营养缺陷型 ???????????????????? 原养型的菌落（即出现个别正常型的细菌） 那么这些原养型菌落的出现是由接合引起的？ 还是由转化引起的？ 他们先进行U形管实验（P159），结果在LT22一臂获得原养型的菌株，由此推测可能有一种可通过滤膜的过滤性因子（FA）在起作用。进一步利用DNA酶处理，结果FA不受DNA酶影响，从而消除了转化作用的可能性。最后认为FA是一种噬菌体，发现了转导。 ;第33页/共65页;3. 转导的机制 转导是在噬菌体包装中因为错误将细菌染色体片段包装进去成为内含细菌染色体片段“假噬菌体”而发生的。具体过程如下： ? （1）噬菌体侵染细菌。 （2）噬菌体DNA使细菌染色体形成片段，合成噬菌体DNA和外壳。 （3）新噬菌体包装，偶尔将细菌染色体片段也包装进去成为内含细菌染色体片段“假噬菌体”。“假噬菌体”和真噬菌体一起释放出来。 ;（4）“假噬菌体”和真噬菌体一样可再侵染细菌，其中“假噬菌体”侵染时，就将外来的细菌基因注入，经过基因重组改变遗传性状，完成转导的过程。 目前根据转导的机制，已广泛应用在体外包装“假噬菌体”，即将外源基因导入“假噬菌体”中，再侵染细菌，进行基因表达的研究。 ;1.普遍性转导 普遍性转导：指P1、 P22等可以转导沙门氏菌染色体组的任何不同的部分。 如果两个基因始终是一起转导或同时转导（共转导或并发转导）频率较高，那么证明两基因连锁，而且频率越高，则两基因距离越近。 如：a基因和b基因共转导频率高， a和c共转导频率也高， b和c共转导频率低，则3个基因顺序为 b a c;第37页/共65页;若同时观察3因子转导分析，则只做一次实验就可推出其次序。 举例：利用普遍性转导测知leu，thr，azi三个基因顺序。 方法： （1）用噬菌体P1侵染带leu+，t