胚胎冷冻保存.pptxVIP

会计学;　　将胚胎贮存在－196℃超低温下长期保存的方法。这是20世记70年代试验成功的一项新技术，是胚胎移植技术的重大突破。;胚胎冷冻保存的意义;⑴ 渗透性：甘油、乙二醇（EG）、丙二醇（PG）和DMSO等，防止溶质效应。 ⑵ 非渗透性：蔗糖、海藻糖、聚乙二醇、PVP和聚蔗糖等，降低胚胎外液的冰点，减少胚胎外冰晶形成，并能促使胚胎内部的水分外流，从而最终减少胚胎内部冰晶的形成。 基础液： mPBS（改良）、 TCM-199、PBS、HEPES等，最常用mPBS。 ;玻璃化的概念：是一种物理现象，指通过快速降温越过冰晶形成的阶段，不发生结晶即可固化，使溶液形成一种无规则结构的稳定玻璃样固体，且保持液态时正常的分子和离子分布，则胚胎细胞免受损伤。 　　　　即高浓度的抗冻剂，急速冷却后，液体的黏性增加，冰晶不能形成，由液态变为透明半固态的现象。 玻璃化溶液（VS）： 细胞内液抗冻剂：这种抗冻剂分子量小，容易透过细胞膜，使其内部迅速达到玻璃化所需要的浓度，所以称为细胞内液抗冻剂。如二甲基亚砜、甘油、丙二醇，乙酰胺及乙二醇等。 细胞外液抗冻剂：这种抗冻剂分子量较大，一般很难透过细胞膜，所以称为细胞外液抗冻剂。如聚乙二醇、聚蔗糖、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮、海藻糖及牛血清白蛋白（BSA）等。 　　　　上述两种抗冻剂组合后，用基础液mPBS调制成各种玻璃化溶液。; ⑴ 结晶变化： 温度降至冰点时，冰