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发发酵机制与代谢调控会计学发酵机制第1页/共40页发酵机制: 微生物通过其代谢活动,利用基质(底物)合成人们所需要的代谢产物的内在规律代谢控制发酵: 人为的改变微生物的代谢调控机制,使有用的代谢产物过量的积累。发酵方式第2页/共40页对氧需要或不需要 好氧 厌氧培养基液态或固态 液态发酵 固态发酵发酵是在培养基表面还是在深层进行 表面发酵 深层发酵发酵是间歇还是连续 分批发酵 连续发酵菌种是否被固定在载体上 游离发酵 固定化发酵菌种是单一还是混合的菌种单一 纯种发酵 混合发酵相关的代谢途径第3页/共40页EMP途径第4页/共40页糖酵解(glycolysis)EMP途径①葡萄糖 ? 1, 6-二磷酸果糖② 1, 6-二磷酸果糖 ?3-磷酸甘油醛③ 3-磷酸甘油醛 ? 2-磷酸甘油酸④ 2-二磷酸甘油酸 ? 丙酮酸第一节 厌氧发酵机制与代谢调控第5页/共40页在无氧条件下,丙酮酸去向(1)在酵母中,产生乙醇 ;酒精发酵(2)在乳酸菌中,产生乳酸;同型乳酸发酵(3)在梭状芽孢杆菌中,产生乙酰CoA、丁醛、丁醇、丙酮、乙醇;丙酮丁醇发酵。第一节 厌氧发酵机制与代谢调控第6页/共40页一、酵母菌的酒精发酵二、细菌的酒精发酵三、乳酸发酵(同型、异型)四、甘油发酵(亚硫酸盐法、碱法)++ NADH丙酮酸脱羧酶NADH +HCO2 +乙醛丙酮酸乙醇焦磷酸硫胺素、Mg2+乙醇脱氢酶(酵母菌酒精发酵Ⅰ型)第一节 厌氧发酵机制与代谢调控一、酵母菌的酒精发酵第7页/共40页1.乙醇生成机制以丙酮酸脱羧产生的乙醛作为H受体产生乙醇。葡萄糖生成乙醇第8页/共40页总反应式:C6H12O6 +2ADP+2H3PO4→2CH3CH2OH+2CO2+2ATP 2CH3COCOOH 丙酮酸脱羧酶 4ATP CO2 2CH3CHO NADH+H+ 2ADP乙醇脱氢酶 NAD+ C6H12 O6 2C2H5OH巴斯德效应第9页/共40页葡萄糖分解为乙醇的过程中,并无氧气参与,是一个无氧呼吸过程。但在好氧条件下,酵母发酵能力降低,乙醇的积累减少,实质是糖代谢降低——巴斯德效应。第10页/共40页巴斯德效应机制:磷酸果糖激酶是第一个限速酶,它是一种变构酶,受ATP、柠檬酸及其他一些高能化合物的抑制,受AMP、ADP的激活。在好氧条件下,糖代谢进入三羧酸循环,产生柠檬酸等,并通过氧化磷酸化生成大量的ATP。 ATP反馈抑制此酶的活性。细胞内柠檬酸生成量的增加,反馈阻遏磷酸果糖激酶的合成,这种阻遏作用由于ATP存在而加强。由于磷酸果糖激酶受抑制,导致6-磷酸果糖积累,反应平衡时,醛糖:酮糖为7:3,导致6-磷酸葡萄糖积累, 6-磷酸葡萄糖抑制己糖激酶,从而抑制葡萄糖进入细胞。第11页/共40页二、细菌的酒精发酵ED途径:又称2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡糖酸(KDPG)裂解途径ED途径总反应式:C6H12O6+ADP+H3PO4→2C2H5OH+2CO2+ATP第12页/共40页ED途径中的关键反应KDPG 2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡糖酸第13页/共40页ED途径1952年在Pseudomonas saccharophila(嗜糖假单胞菌)中发现,后来证明存在于多种细菌中(革兰氏阴性菌中分布较广)。 ED途径可不依赖于EMP和HMP途径而单独存在,是少数缺乏完整EMP途径的微生物的一种替代途径,未发现存在于其它生物中。少数假单胞杆菌(Pscudomonas),如林氏假单胞菌()能利用葡萄糖经ED途径进行酒精发酵。第14页/共40页细菌酒精发酵ED途径总反应式:C6H12O6+ADP+H3PO4→2C2H5OH+2CO2+ATP在末端假单胞菌中能使2分子丙酮酸脱羧,然后还原乙醛生成2分子乙醇和2分子CO2。而在其他假单胞菌中氢载体氧化后,生成1分子乙醇、1分子乳酸和1分子CO2。细菌的酒精发酵特点第15页/共40页20世纪70年代出现代谢速度快发酵周期短酒精产率高(比酵母菌)厌氧和耐高温代谢副产物少能利用各种糖类但耐酒精度比酵母菌低pH5 (酵母菌pH3 ) ,较易染菌第16页/共40页三、乳酸发酵1.同型乳酸发酵 通过EMP途径,由丙酮酸还原生成乳酸。发酵产物中只有乳酸。 进行同型乳酸发酵的细菌主要有乳链球菌、乳酪杆菌、保加利亚杆菌、德氏乳杆菌。2.异型乳酸发酵 通过HMP(PK)途径,产物中除乳酸外,还有乙醇、乙酸等有机化合物的发酵。 进行异型乳酸发酵的有肠膜明串珠菌、葡聚糖明串珠菌。第17页/共40页1.同型乳酸发酵无氧条件下,葡萄糖先经经EMP途径得到丙酮酸第18页/共40页2.异型乳酸发酵HMP途径——戊糖磷酸途径第19页/共40页异型
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