基因工程的基本操作程序优质课.pptxVIP

会计学;;一、目的基因的获取;;;某种生物的全部DNA;生物某个发育时期的mRNA;基因组DNA文库与cDNA文库的比较;1，基因组文库内的目的基因：: 动物细胞的基因可以在植物细胞中表达 真核细胞的基因可以转到真核细胞中表达，原因是受体细胞含有剪切内含子的酶 真核生物的基因转移到原核生物中不能得到表达，原因是原核生物不含有剪切内含子的酶。 所以说基因组文库中的目的基因在生物间的交流是部分基因可以 包括所有的原核生物基因和部分真核基因（取决于受体细胞） 2.而cDNA文库中的目的基因是由mRNA逆转录得到的，不含有内含子序列，所以在物种间的基因交流是畅通无阻的 ;;依据：目的基因的有关信息。 如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性;（2）利用PCR技术扩增目的基因;模板DNA;;;;;;③过程：;④方式：以_____方式扩增，即____;;（3）人工合成法： ;蛋白质;二、基因表达载体的构建（核心）;2.基因表达载体的组成：;;（1）用_________切割质粒，使其出现切口露出____________。 （2）用___________切割目 的基因，使其产生_____ ____________。;三、将目的基因导入受体细胞------转化;1、将目的基因导入植物细胞;;（2）基因枪法------单子叶植物;（3）花粉通道法;2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： ;3、将目的基因导入微生物细胞;四、目的基因的检测与鉴定;（1）检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因;　 基因探针通过分子杂交与目的基因结合，产生杂交带，能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。 ;(2)检测目的基因是否转录出了mRNA;;;;目的基因的表达和检测;;;