任务6 蜂蜜中杀虫脒残留量的测定.pptxVIP

农产品检测技术项目九 其他农产品检验任务6 蜂蜜中杀虫脒残留量的测定项目九其他农产品检验一、测定意义二、测定方法及测定原理三、仪器用具四、试剂五、操作步骤六、结果计算蜂蜜中杀虫脒残留量的测定一、测定意义杀虫脒属甲脒类杀虫、杀螨剂，实验证明杀虫脒对人体具有潜在的致癌危险性，在农业部、卫生部发布的《农药安全使用规定》中把它列为高毒杀虫剂。目前世界上多数国家对食品中的杀虫脒及其代谢产物的残留都有严格限制，要求蜂蜜中的最高残留限量一般不超过0.010mg/kg。此外，联合国食品法典委员会（CAC）规定：“杀虫脒的残留量应为杀虫脒和其代谢物的总和”。在已有的测定方法中，脉冲极谱法灵敏度不高，不能满足检测要求，液相色谱衍生化法虽然灵敏度高，但操作较复杂；气相色谱氮磷检测器法及气相色谱-质谱测定杀虫脒母体的方法操作简便可靠，但无法同时测定杀虫脒的代谢产物。为此，采用液相色谱-质谱联用方法灵敏度高，重现性好，并且操作简便。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定二、测定方法及测定原理测定方法： GB 23200.96-2016《食品安全国家标准 蜂蜜中杀虫脒及其代谢产物残留量的测定 液相色谱-质谱 质谱法》。测定原理：试样用氢氧化钠水溶液稀释溶解，经HLB固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定 量。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定三、仪器用具1、液相色谱—串联质谱仪[配有电喷雾离子源（ESI）]2、分析天平（感量0.01g）3、涡漩混匀器4、固相萃取装置5、氮吹仪6、离心管（15mL）7、玻璃试管（10 mL，具刻度）8、恒温水浴锅9、微孔滤膜（0.22微米，有机系）。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定四、试剂1、氢氧化钠溶液（0.02 mol/L）：分析纯。2、硫酸溶液（1 mol/L）：分析纯。 3、硫酸溶液（10 mmol/L）：分析纯。 4、乙腈水溶液：乙腈：水（3+7，v/v）。 5、甲酸溶液（0.1%）：分析纯。 6、杀虫脒标准品：纯度≥99%。 7、4—氯邻甲苯胺标准品：纯度≥99%。 8、标准储备液：分析纯。 9、标准中间溶液：分析纯。 10、基质标准工作溶液：分析纯。 11、HLB固相萃取小柱（亲水亲脂平衡柱）蜂蜜中杀虫脒残留量的测定五、操作步骤1、试样制备 取代表性蜂蜜样品约500g，取样部位按GB 2763附录A执行，对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀。对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，在融化时必须注意防止水分挥发。装入洁净容器，密封，标明标记。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定五、操作步骤2、提取 称取试样1 g（精确到0.01 g）于15 mL离心管中，加入10 mL 0.02 mol/L氢氧化钠溶液，在2000 r/min下涡旋震荡，混匀。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定五、操作步骤3、净化 将上述提取液转移至HLB固相萃取柱中，再加入3 mL水洗涤液离心管，过柱。用3 mL水和1 mL 10 mmol/L硫酸溶液淋洗小柱，弃去淋出液，抽干。用2 mL乙腈洗脱，收集于10 mL试管中，洗脱液在室温下氮吹近干，准确加入1.0 mL乙腈：水（3+7，V/V），振荡溶解，过0.22 微米滤膜，供测定。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定五、操作步骤4、杀虫脒及其代谢物的测定（1）液相色谱一质谱参考条件：色谱柱：C18色谱柱，长50 mm，内径4.6 mm，粒径1.8 微米，或相当者；流动相：乙腈-0. 1%甲酸溶液。流速：0. 50 mL/min;柱温：30℃：进样量：10 IiL;离子源：电喷雾离子源(ESI)；扫描方式：正离子；监测方式：多反应监测(MRM)。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定五、操作步骤4、杀虫脒及其代谢物的测定（2）色谱测定与确证 根据样液中被测化合物的含量，选定峰面积相近的标准工作溶液，对标准工作液和样液等体积参插进样，测定标准工作溶液和样液中被测化合物的响应值均应在仪器检测的线性范围内，用标准工作曲线按外标法定量。在上述色谱条件下杀虫脒和4—氯邻甲苯胺的参考保留时间分别为1.3min和4.4 min。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定五、操作步骤5、空白实验除不加试样外，均按上述测定步骤进行。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定六、结果计算X=?式中：Xi—试样申杀虫脒或4—氯邻甲苯胺残留含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；Ai—样液中杀虫脒或4—氯邻甲苯胺的峰面积；V—样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；Asi—标准工作溶液中杀虫脒或4一氯邻甲苯胺的峰面积；Csi—标准工作溶液中杀虫脒或4一氯邻甲苯胺的浓度，单位为微克每毫升(?g/mL)；m—最终样液代表的试样量，单位为克（g）。蜂蜜中杀虫脒残留量的测定六、结果计算 计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数