项目八 任务4 蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验.pptxVIP

项目八 禽蛋检验农产品检测技术 一、仪器用具二、实践操作三、数据处理及记录四、注意事项项目八 禽蛋检验任务4 蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验 一、仪器用具蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验（1）气相色谱仪 具电子捕获检测器（ECD）（2）旋转蒸发仪（3）凝胶净化柱长30.0cm，内径2.3~2.5cm具塞玻璃层析柱，柱底垫少许玻璃棉。用洗脱液乙酸乙酯-环己烷（1+1）浸泡的凝胶以湿法装入柱中，柱床高约26cm，凝胶始终保持在洗脱剂中。（4）全自动凝胶色谱系统：带有固定波长（254nm）紫外检测器，供选择使用。（5）电动振荡器（6）天平（7）微量注射器（8）氮气浓缩器（9）组织捣碎机 二、实践操作（一）试剂（1）丙酮 重蒸；（2）石油醚 沸程30~60℃，分析纯，重蒸（3）乙酸乙酯 重蒸（4）环已烷 重蒸；（5）正己烷 重蒸；（6）氯化钠（7）无水硫酸钠：分析纯，将污水硫酸钠置干燥箱中，于120℃干燥4h，冷却后，密闭保存。蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验 二、实践操作（8）聚苯乙烯凝胶（Bio-Beads S-X3）：200~400目，或同类产品。（9）农药标准品 α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、p,p’-滴滴涕、o,p’-滴滴涕、p,p’-滴滴伊、p,p’-滴滴滴纯度均≥99%。（10）标准溶液的配制 分别准确称取各农药标准品，用少量苯溶解，再以正己烷稀释成一定浓度的储备液。再根据各农药在仪器上的响应情况，以正己烷配制混合标准应用液。蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验 二、实践操作（二）操作步骤 试样经提取、净化、浓缩、定容，用毛细管柱气相色谱分离，电子捕获检测器检测，以保留时间定性，外标法定量。1、试样制备2、提取与分配3、净化4、测定蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验 二、实践操作1、试样制备 蛋品去壳，制成匀浆。2、提取与分配称取试样20g（精确至0.01g）于250mL具塞锥形瓶中，加水5mL（视试样水分含量加水，使总量约20g。通常鲜蛋水分含量约75%，加水5mL即可），再加40mL丙酮，于振荡器上振摇30min，加氯化钠6g，充分摇匀，再加30mL石油醚，振摇30min。静置分层后，将有机相全部转移至100mL具塞三角瓶中经无水硫酸钠干燥，并量取35mL上清液于旋转蒸发瓶中，浓缩至约1mL，加2mL乙酸乙酯-环己烷（1+1）溶液再浓缩，如此重复3次，浓缩至1mL，供凝胶色谱层析净化使用，或将浓缩液转移至全自动凝胶渗透色谱系统配套的进样试管中，用乙酸乙酯-环己烷（1+1）溶液洗涤旋转蒸发瓶数次，将洗涤液合并至试管中，定容至10mL。蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验 二、实践操作3、净化选择手动或全自动净化方法的任何一种。（1）手动凝胶色谱柱净化：将此浓缩液经凝胶柱，以乙酸乙酯-环己烷（1+1）溶液洗脱，弃去0~35mL流分，收集35~70mL流分。将其旋转蒸发浓缩至约1mL，再经凝胶柱净化收集35~70 mL流分，蒸发浓缩，用氮气吹除溶剂，以石油醚定容至1 mL，留待GC分析。（2）全自动凝胶渗透色谱系统净化：试样由5mL试样环注入凝胶渗透色谱（GPC）柱，泵流速5.0mL/min，以乙酸乙酯-环己烷（1+1）溶液洗脱，弃去0-7.5min流分，收集7.5~15min流分，15~20min冲洗GPC柱。将收集的流分旋转蒸发浓缩至约1mL，用氮气吹至近干，用正己烷定容至1mL，留待GC分析。蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验 二、实践操作4、测定（1）色谱柱的安装色谱柱DM-5石英弹性毛细管柱，0.25μm，30m×0.32mm(内径）石英弹性毛细管柱；（2）开机打开载气钢瓶总阀，调节输出压力。打开载气净化器开关，调节载气合适的柱前压，打开气相色谱仪电源开关。设置柱温（程序升温）：进样口温度280℃。不分流进样，检测器为电子捕获检测器(ECD)。载气为氮气(N2)，柱前压0.5MPa；流速：1mL/min；尾吹：25mL/min。蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验 二、实践操作（3）进样分析仪器在设定的条件下平衡，基线平稳后，分别量取1uL混合标准液及试样净化液注入气相色谱仪中，以保留时间定性，以试样和标准溶液的峰高或峰面积比较定量。色谱图出峰顺序：α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、p,p’-滴滴伊、p,p’-滴滴滴、o,p’-滴滴涕、p,p’-滴滴涕。蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验 三、结果计算及数据记录蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验 三、结果计算及数据记录蛋及蛋制品中六六六、 滴滴涕残留量的检验试样中各农药残留量检验数据记录如表8-5 所示。 四、注意事项1、乙酸乙酯易燃易爆、易挥发，