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实验一斜面培养基制作会计学第1页/共7页三.实验准备1.器具：?天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、菜板、小铝锅等。?2．材料：?马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。四、实验内容 过程：制马铃薯滤液→融化琼脂→培养基的分装→棉塞的制作 方法步骤：第2页/共7页1．配方（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15~20g，自来水1000ml，pH自然。?2．制作方法（1）制滤液：?马铃薯刮去粗皮，去芽眼，切成碎块，称量后放锅中，加水1200~1300ml，将其煮沸20min。用双层纱布过滤，取1000ml滤液。第3页/共7页（2）化琼脂：?将滤液加热至将沸腾时加入琼脂，不断搅拌，注意控制火力不要使培养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入剩余原料，并使其溶解（用热水补足水量）. （3分装 :通过漏斗装置，趁热将培养基分装于试管中，装量约占试管高度的1/4（分装三角瓶，其 第4页/共7页 装量以不超过其容积的一半为宜）。注意管口或瓶口不要沾染培养基。（4）制棉塞?棉花以白色长绒脱脂棉为宜。根据试管口大小取棉，将其卷成棉塞，最好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑，外包的纱不能折、松紧适宜等。第5页/共7页A.正确; B.不正确第6页/共7页（5）?包扎：?管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。（6）、灭菌（7）、摆斜面（8）、存放冰箱（4-6C）?六、作业1、简述高压灭菌锅的使用。2、何谓灭菌？简述热力灭菌的类型和原理。3.何时加入琼脂？融化时注意什么问题？分装的技术要求有哪些？?4. 棉塞的作用有哪些和技术要求？菌种培养时管口堵胶塞或软木塞行吗？为什么？
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