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会计学;一、目的要求;二、基本原理;牛乳的细菌学检查方法:;美兰是一种氧化还原指示剂,在厌氧环境中,它将被还原成无色。
如果牛乳中有细菌生长繁殖,必将造成其中溶解氧的减少,牛乳样品中的氧化-还原电势降低。通过加入其中美兰颜色的变化速度,可鉴定该牛乳的质量。
在30分钟内美兰被还原成无色的样品为“很差”;在30min~2h之间被还原为“差质量”;在2~6h之间被还原为“尚好”或“中等”;在6~8h之间被还原者,为“好质量”。;在30min内美兰被还原成无色的样品为“很差”;
在30min~2h之间被还原为“差质量”;
在2~6h之间被还原为“尚好”或“中等”;
在6~8h之间被还原者,为“好质量”。;广泛应用的常规方法。
此方法较为敏感,牛乳中含有少量细菌时,能得出比较正确的结果。我国消毒牛乳的卫生标准是细菌总数30 000个/ml。;牛乳样品和培养基
亚奥特巴氏消毒牛奶样品
溶液或试剂
美兰溶液(1:250 000),无菌水等
仪器或其他用具;美兰还原酶试验法
标记2个无菌试管1、2
分别向2个试管中加入5ml的牛乳样品(1号亚奥特-变质,2号亚奥特-新)
分别向试管中各加入1ml美兰,盖紧管塞;轻轻倒转试管约4次,置于37℃水浴中,并记录培养时间
测试管在水浴中稳定5min中后,取出,轻轻倒转一次后再放回水浴中
每隔30min观察记录试管中美兰颜色的变化,直至3~6h;将水浴锅的温度调至80℃
将牛乳样品用力摇匀,使微生物能均匀分布
用灭菌的10ml吸管吸取5ml生牛乳样品放入灭菌试管内,然后将试管放入调好温度的水浴锅中,水面要超过牛乳表面
保持15min,并不时摇动
一到15min立刻取出试管,用流水冲试管外壁,使其中的牛乳迅速冷却。;将牛乳样品充分摇匀,系列稀释至10-2、10-3和10 -4 。
用1ml无菌吸管从三个梯度分别取1ml注入空白平板内
各平板倾注约15ml已经融化并冷却至45 ℃左右的牛肉膏蛋白胨培琼脂,立即放到桌上摇匀
凝固后,倒置于37 ℃培养箱内,培养24h。;选择长有30~300个菌落的平板计数,并计算出1ml牛乳中的细菌总数。
普通生牛乳样品中的检查同上法,但稀释度为10-3 、10 -4和10-5 。
;记录实验结果
美兰还原酶试验法:
标准平板计数法
思考题
1、根据你所检查的2份牛奶样品的结果,说明巴氏消毒的效果,其细菌总数是否合乎卫生标准?分析出现此结果的原因。
2、巴氏消毒的牛乳自然发酵的结果与生牛乳自然发酵的结果有何不同?根据此原理,说明实验样品一(变质)形成的原因。
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