医学微生物学实验一.pptxVIP

《医学微生物学》实验课件南华大学病原学实验教学中心Etiology Experimental Teaching Center of University of South China 第1页，共27页。实验内容一、显微镜的使用操作及注意事项二、细菌的形态和特殊结构观察： 1.自阅片：破伤风杆菌（示芽胞）、变形杆菌（示鞭毛） 2. 示教片：肺炎链球菌（示荚膜）三、革兰染色法（自做） 第2页，共27页。实验室规则微生物学实验要求 1、微生物无处不在：故要树立有菌观念，实验过程要无菌操作; 2、实验材料为病原微生物，具有感染性 1）穿好白大衣，除必要的书籍、记录本及文具外，其他 个人用品不得带入实验室； 2）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材料带出实验室第3页，共27页。3、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二天观察结果，要求同学们亲自观察，并详细记录结果，完成实验报告；4、爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，实验室仪器不得乱摸乱碰；实验自阅玻片标本损坏10元/张；5、实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，并负责关门、关窗、关水、关电。第4页，共27页。一、显微镜的使用操作及注意事项第5页，共27页。二、显微镜的使用第6页，共27页。 （一）观察前准备1. 显微镜拿取 2. 调节通光量 使用油镜时，为使通光量最大，可采用： 1）光圈开到最大； 2）聚光器上升到最高； 3）低倍（10×）物镜下，转动凹面反光镜，使视野的光照达到最明亮 均匀。第7页，共27页。（二）低倍镜观察?操作要点 粗旋钮调节：物像出现 细旋钮调节：物像清晰为什么镜检任何标本都要先用低倍镜观察？第8页，共27页。（三）高倍镜观察操作要点在低倍镜转换高倍镜（40x ）适当调节细螺旋即可看到物像 注意忌使用粗螺旋，否则极易压碎标本．甚至损坏物镜。第9页，共27页。（四）油镜观察 1.滴油（不要抹开） 2.转换为油镜头，使其浸入香柏油 3.调节细螺旋即可找到物像 油镜头须浸入油中 不使用粗螺旋，细螺旋也不可无限旋转，否则可压 碎玻片及损坏物镜头 光圈需开至最大 聚光器须上升至最高注意第10页，共27页。4.玻片处理5.镜头擦拭：限取3张擦镜纸 ---如香柏油不慎玷污非油浸镜头应立即直接拭去 （勿用二甲苯）---擦拭时沿一个方向，禁止旋转6.还原各部分7.填写显微镜使用登记表注意第11页，共27页。二、细菌的形态和特殊结构观察第12页，共27页。（一） 细菌的基本形态1．球菌： 葡萄球菌(葡萄状排列) 链球菌 (链状排列) 脑膜炎奈瑟菌(成双排列)2．杆菌： 大肠杆菌、枯草杆菌等3．螺形菌： 霍乱弧菌等 第13页，共27页。（二）细菌的特殊结构1. 荚 膜荚膜与微荚膜概念化学成分变异医学意义 第14页，共27页。荚膜菌体肺炎链球菌（示荚膜）取材：小鼠腹腔渗出液染色法：Hiss染色放大倍数：10X100第15页，共27页。2. 鞭 毛（Flagllum）概念数目、位置和排列可不同鞭毛是细菌的运动器官医学意义：第16页，共27页。鞭毛菌体变形杆菌（示鞭毛）取材：纯培养物染色法：鞭毛染色放大倍数：10X100第17页，共27页。3. 芽 胞概念形状、直径、位置随菌种而不同形成条件非细菌的繁殖体抵抗力强医学意义：第18页，共27页。芽胞菌体破伤风梭菌（示芽胞）取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100第19页，共27页。4. 菌 毛概念在光镜下看不见，使用电镜才能观察到分类：普通菌毛和性菌毛医学意义第20页，共27页。三、革兰氏染色法 常用染色方法 单染法： 一种染料使细菌着色，如美蓝和复红染色； 复染法： 两种或两种以上染料染色，有助于鉴别细菌，如革兰染色法和抗酸染色法。第21页，共27页。G-菌：类脂质多肽聚糖少G+菌：肽聚糖多交联度大类脂质少结晶紫卢戈碘液液酒精复红【原理】渗透性学说：两类细菌的细胞壁成分和结构差异第22页，共27页。【材料】1. 葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。2. 革兰染色液。第23页，共27页。【步骤】 涂片：注意无菌操作 干 燥 固 定 染 色第24页，共27页。 初染：结晶紫染液染 lmin 水洗，甩干 媒染：卢戈氏碘液染1min 水洗，甩干 脱色： 酒精脱色约30s 水洗，甩干 复染： 复红染液染1min 水洗，甩干 印干 油镜观检染色关键步骤！第25页，共27页。【结果】革兰阳性球菌革兰阴性杆菌革兰染色结果取材：培养混合菌液放大倍数：100X10第26页，共27页。作 业1、细菌特殊结构绘图2、革兰染色法的完全实验报告（实验名称、目的、材料、步骤、结果、分析、结论）第27页，共27页。