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免疫学检测 第一节 抗原抗体的测定 一、抗原抗体反应的相关理论 抗原具有抗原性(免疫反应性),可与相应的抗体在体外发生特异性结合,并在一定条件下出现可见反应现象。故可用已知的抗原(或抗体)检测未知的抗体(或抗原)。因抗体主要存在与血清中,故又称为血清学反应。 (一)抗原抗体反应的特点 1.特异性 2.可逆性 3.比例性和结合物的可见性 4.阶段性(1)特异性结合阶段 (2)可见反应阶段 (二)抗原抗体反应的主要影响因素 1.抗原、抗体反应的浓度、比例 2.电解质 3.温度 4.酸碱度 三、血清学反应的种类 (一)凝集反应(agglutination) 1.直接凝集反应(direct agglutination) 是指颗粒性抗原(凝集原)与相应的抗体(凝集素)直接结合所呈现的凝集现象。如红细胞ABO血型的测定,细菌凝集试验。 2.间接凝集反应 (indirect passive agglutination) 是可溶性抗原或抗体吸附于与免疫无关的微球载体上,形成致敏颗粒,与相应的抗体或抗原在电解质存在的条件下进行反应,出现凝集。 (二)沉淀反应(precipetation) 是指可溶性抗原与相应抗体在合适的电解质存在下,出现肉眼可见的沉淀现象。 1.单向琼脂扩散试验 2.火箭电泳 3.双向琼脂扩散试验 4.对流免疫电泳 (三)补体结合试验 (complement fixation test,CFT) 是在补体参与下,以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统,来检测未知抗原或抗体的试验。 (四)中和反应(nertralization) 毒素、酶、激素或病毒等与其相应的抗体结合后,导致生物活性的丧失。 1.病毒中和反应 2.毒素中和反应 (五)免疫标记技术 1.免疫酶技术 2.免疫荧光技术 3.放射免疫测定 4.免疫胶体金标记技术 第二节 免疫细胞的检测 一、免疫细胞的分离 (一)外周血单个核细胞的分离 (二)T、B及其它免疫细胞的纯化 (三)免疫磁珠分离法 (四)荧光激活细胞分离仪分离法 二、免疫细胞的计数 (一)花环形成试验 (二)荧光抗体染色
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