S1P受体激动剂FTY720与hAMSCs联合治疗烟雾致大鼠急性肺损伤研究.pdfVIP

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目录 中文摘要I Abstract IV 第1 章 前言 1 1.1 ALI 病理特征 1 1.2 ALI 的治疗方法 2 1.3 ALI 的细胞疗法 2 1.4 ALI 中的鞘脂代谢 3 1.5 S1P 产生及其受体 3 1.5.1 鞘氨醇激酶 4 1.5.2 S1P 裂解酶 4 1.5.3 S1P 受体 4 1.5.4 S1P 转运 5 1.6 S1P 生物学功能 5 1.6.1 维持血管屏障功能 5 1.6.2 免疫调节功能 5 1.6.3 调节细胞增殖、迁移与凋亡 6 1.7 ALI 与S1P 6 1.8 S1P 受体激动剂FTY720 6 1.9 FTY720 与MSCs 联合治疗的潜力 7 第2 章 hAMSCs 治疗烟雾致伤大鼠ALI 的研究 9 2.1 实验材料 9 2.1.1 实验动物 9 2.1.2 主要设备仪器 9 2.1.3 主要试剂 10 2.1.4 实验试剂配制 12 2.2 实验方法 12 2.2.1 烟雾吸入致伤大鼠ALI 模型的建立 12 2.2.2 hAMSCs 的分离与培养 12 2.2.3 hAMSCs 流式鉴定表面标志物 13 2.2.4 动物分组 13 2.2.5 动脉血气分析 13 2.2.6 大鼠肺组织提取 13 VIII 2.2.7 肺组织湿/干重比 13 2.2.8 肺组织HE 染色 14 2.2.9 ELISA 检测肺组织匀浆中TNF-α、IL-6、IL-10 的水平 15 2.2.10 RT-PCR 检测肺组织中S1P、SphK1、S1PR1 mRNA 水平 15 2.2.11 Western-blot 检测肺组织中S1P、SphK1、S1PR1 蛋白水平 17 2.2.12 统计学处理 17 2.3 实验结果 18 2.3.1 hAMSCs 的形态 18 2.3.2 hAMSCs 的鉴定 18 2.3.3 大鼠动脉血气分析 19 2.3.4 大鼠肺组织W/D 水平变化 20 2.3.5 大鼠肺组织病理变化 20 2.3.6 大鼠肺组织匀浆中炎症因子水平变化 21 2.3.7 大鼠肺组织中S1P、SphK1 及S1PR1 mRNA 表达 22 2.3.8 大鼠肺组织中S1P、SphK1 及S1PR1 蛋白表达 23 2.4 小结与讨论 24 第3 章 FTY720 与hAMSCs 联合治疗大鼠ALI 的研究 27 3.1 实验材料 27 3.1.1 主要试剂 27 3.1.2 实验试剂配制 28 3.2 实验方法 28 3.2.1 FTY720 体外刺激hAMSCs 28 3.2.2 CCK8 检测细胞增殖

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