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新生儿溶血病血清学检查 通过血清学检查可了解:母婴血型是否不合、母亲血清是否存在与患儿红细胞相对应的IgG性质的抗体、患儿红细胞是否被来自母亲的IgG抗体所致敏,从而对新生儿溶血病进行预防诊断和治疗。 血型血清学检查对新生儿溶血病的诊断有重要意义第一页,共三十一页。母婴ABO血型不合溶血病的血清学检查 孕妇血样本检查(产前检查)是孕妇血液常规进行产前检查,用以鉴定这些孕妇妊娠患新生儿溶血病胎儿的危险,一旦被鉴定有此危险时,定期过筛试验可用于确定影响的程度。 有关试验包括血型鉴定、血清IgG抗A(B)抗体检查、不规则抗体筛选和鉴定第二页,共三十一页。孕妇血样本检查血型鉴定:包括夫妇的ABO、Rh血型以及 夫妇血型是否配合。第三页,共三十一页。孕妇血样本检查血清中IgG抗A(B)抗体检查: ABO系HDN由IgG抗A(B)引起,检测母亲血清中有无IgG性质的抗A(B)抗体及效价,即可预ABO系HDN发生的可能性。 用2-巯基乙醇(2-Me)处理孕妇血清,然后进行倍比稀释,加入相应红细胞,用间接抗球蛋白法检测;抗体效价大于64时,其血型不合的胎儿可能受害第四页,共三十一页。孕妇血样本检查抗体筛选和鉴定 取母亲血清与筛选红细胞作盐水试验、抗球蛋白试验、聚凝胺试验 。 如果该试验阳性,应进一步用配组谱细胞作抗体鉴定,以确定抗体的特异性。当检出某一抗体后,需进一步鉴定双亲的相关红细胞抗原。第五页,共三十一页。ABO-HDN患儿血样本检查 患儿血样本检查是诊断ABO系HDN的最有利证据,证实患儿红细胞是否被来自母体的IgG抗A(B)抗体所致敏。 试验包括红细胞直接抗球蛋白试验、游离抗体试验、抗体放散试验、血清胆红素测定。第六页,共三十一页。ABO-HDN患儿血样本检查红细胞直接抗球蛋白 如果新生儿红细胞被IgG抗A(B)所致敏,直接抗球蛋白试验能得到阳性结果。由于新生儿的A(B)抗原密度比成人低,所以被结合的抗体亦很少,呈弱阳性的混合视野外观。第七页,共三十一页。第八页,共三十一页。ABO-HDN患儿血样本检查游离抗体试验 新生儿血清中的IgG抗A(B)抗体来自母亲,如果患儿血清中发现有与其红细胞不配合的IgG抗A(B)时,应将其血清与A、B、O试剂红细胞用间接抗球蛋白试验加以证实。第九页,共三十一页。ABO-HDN患儿血样本检查 抗体放散试验 用加热放散法提取致敏于红细胞表面的抗体 将抗体放散于盐水溶液中,然后加入经酶处理的 A、B、O红细胞,作间接抗球蛋白试验,此法甚为敏感,即使是直接抗球蛋白试验阴性的患儿,一旦本试验出现阳性结果,即可明确诊断。本试 验是新 生儿溶血病三项试验中最具价值的一项试 验。第十页,共三十一页。ABO-HDN患儿血样本检查放散试验注意事项:洗出尽量多的红细胞进行放散 注意放散液的温度不可超过56℃,以防溶血天冷时放散液离心注意保温 将尽可能多的放散液吸出注意除去放散液中残留的红细胞 第十一页,共三十一页。 在放散试验的结果观察中,会遇到 一种交叉反应性抗-AB抗体,它针对的特异性是A和B抗原所共有的,因而它能凝集A型和B型红细胞,抗-AB同样可引起ABO溶血病。第十二页,共三十一页。ABO-HDN患儿血样本检查血清胆红素测定: 采用Lathe-Ruthven氏改良法,较适合于新生儿高胆红素血症的检查。生理性黄疸一般不超过150μmol/L (8.8mg/dl),ABO新生儿黄疸常可达200μmol/L(11.7mg/dl)以上。脐血胆红素值高于68μmol/L (4mg/dl),24小时后血清胆红素值达340μmol/L (20mg/dl)以上者,应给予换血治疗。 第十三页,共三十一页。ABO-HDN游离、释放试验阳性和阴性的判定,以出现可以致敏新生儿红细胞的血型抗体为阳性。如:第十四页,共三十一页。通过直抗、游离、释放试验确定ABO-HDN:第十五页,共三十一页。ABO新生儿溶血病判读中可能遇到的问题直抗阳性而释放试验阴 可能是试验误差或抗C3阳性造成或是药物引起新生儿溶血病在A(B)细胞的释放液中检出抗-B(A ) 在释放试验的结果观察中,会遇到交叉反应性抗-AB抗体,如果在A(B)细胞的释放液中仅仅检出抗B(A),却未检出抗A(B)时,仍认为是阴性。第十六页,共三十一页。母婴Rh血型不合溶血病的血清学检查孕妇血样本的检查 Rh阴性孕妇的抗体检测应分别在20、28、34周进行。检测包括对母亲的血清用抗体筛选红细胞以及(在ABO血型配合时)丈夫红细胞作抗体筛选。第十七页,共三十一页。孕妇血样本的检查 如果抗体筛选试验阳性则做抗体鉴定,确定抗体特异性确定孕妇Rh血型,以印证抗体鉴定结果测定抗体效价 第十八页,共三十一页。 检出有意义的抗体后,应定期复查,观测抗体效价变化情况,抗体效价持续升高提示胎儿可能受
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