原核基因表达调控模式.pptVIP

这时的前导区结构是2-3配对，不形成3-4配对的终止结构，所以转录可继续进行，直到将色氨酸操纵子中的结构基因全部转录完毕为止。测定结果发现，在缺乏色氨酸时所有的RNA聚合酶都能经过弱化子继续参与转录。加上取消阻遏增加的约70倍的表达，总表达量可增加约700倍。 第九十四页，共一百四十页，2022年，8月28日 第九十五页，共一百四十页，2022年，8月28日 色氨酸浓度低时 1、tRNAtrp-色氨酸供给不足，核糖体遇到色氨酸密码子时就停顿 2、在4区转录未完成时，2区和3区就形成发夹结构 3、3区和4区不能形成发夹结构（终止信号），导致转录通读；RNA聚合酶继续沿DNA移动，完成结构基因的转录 第九十六页，共一百四十页，2022年，8月28日 当培养基中色氨酸浓度高时，核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在4区被转录之前，核糖体就到达2区，这样使2-3不能配对，3-4区可以自由配对形成茎-环式的终止子结构，使得只有约10％的RNA聚合酶能继续参与色氨酸操纵子结构基因的转录。 第九十七页，共一百四十页，2022年，8月28日 色氨酸操纵子衰减作用机制 第九十八页，共一百四十页，2022年，8月28日 色氨酸浓度高时 1、tRNAtrp-色氨酸供给充足，核糖体迅速通过色氨酸密码子到达2区 2、3区和4区形成发夹结构（终止信号） 3、衰减作用发生，转录终止，RNA聚合酶释放，不能完成结构基因的转录 第九十九页，共一百四十页，2022年，8月28日 由此可见，弱化子对RNA聚合酶转录的终止依赖于前导肽翻译中核糖体所处的位置，而细胞中色氨酸存在与否，决定了mRNA 转录的弱化子结构，使弱化子中1、2、3、4区域呈现竞争性配对，从而产生弱化效应，这是色氨酸操纵子第二水平调控的机制。应该指出，色氨酸含量变化对阻遏过程和弱化过程的作用方向是相同的。前者主要控制操纵子基因表达的启动，而后者主要决定转录和翻译是否能继续进行下去。 第一百页，共一百四十页，2022年，8月28日 弱化子作用 第一百零一页，共一百四十页，2022年，8月28日 第一百零二页，共一百四十页，2022年，8月28日 第一百零三页，共一百四十页，2022年，8月28日 为什么需要阻遏体系？ 当大量Trp 存在时，阻遏系统起作用。阻抑蛋白与之结合，阻止先导mRNA合成。 为什么需要弱化系统？ 当trp浓度低时，阻抑蛋白从有活性变为无活性，速度极慢，不能很快引发trp 合成。因此需要一个能快速作出反应的系统，以保持培养基中适当的Trp水平。 第一百零四页，共一百四十页，2022年，8月28日 两个调控系统，避免浪费提高效率； 阻遏系统 高水平trp时，不转录 低水平trp时，转录至前导序列 弱化系统 细调 原核生物细致的精细调控机制，增强原核生物对环境的适应性 第一百零五页，共一百四十页，2022年，8月28日 衰减作用和负控阻遏的关系 1、负控阻遏系统和衰减作用同样对色氨酸水平应答 2、衰减作用使色氨酸操纵子结构基因的转录被 抑制了10倍（细调）； 3、色氨酸阻遏蛋白的阻遏作用使转录被抑制了70倍（粗调）； 4、色氨酸水平对色氨酸操纵子结构基因的表达施加了700倍的调节效果。 第一百零六页，共一百四十页，2022年，8月28日 7.4 转录水平上的其他调控方式 转录过程涉及转录机器附着于DNA，识别启动子序列，起始RNA的合成，延伸和终止。转录的任何一步都受到调控，其中某些步骤是主要的调控点，比如RNA转录的起始相对延伸和终止来说。自然选择使得生物的调控策略达到最优化。转录过程的调节是生物基因表达调节最有效的方式。 第一百零七页，共一百四十页，2022年，8月28日 7.4.1 σ因子的调节作用 不同的 σ 因子可以独立地起作用。但是，为了保证细胞准确响应不同的环境信号变化， σ 因子之间常常交互作用构成网络调控模式。使得原核基因的表达稳定而平衡。 σ 因子本身的活性受到蛋白水解酶的调控，也能被同源的抗σ因了失活。这些抗σ因子能够与特定的 σ 因子结合，阻止它们与RNA聚合酶的组装。 第一百零八页，共一百四十页，2022年，8月28日 D. 当阻遏物与操纵区相结合时，lac mRNA的转录起始受到抑制。 E. 诱导物通过与阻遏物结合，改变其三维构象，使之不能与操纵区相结合，诱发lac mRNA的合成。 第六十二页，共一百四十页，2022年，8月28日 培养基中有无诱导物对lac mRNA及β-半乳糖苷酶活性的影响 第六十三页，共一百四十页，2022年，8月28日 阻遏物lac I基因产物及功能lac操纵子阻遏物mRNA是由弱启