荧光定量PCR技术.pptxVIP

1传统的临床微生物检测方法 细菌涂片 细菌培养 免疫学技术 分别存在检出率低、周期长、特异性差的缺点。 第1页/共37页第一页，共38页。 2普通PCR临床检测技术的缺点普通PCR临床检测技术虽然解决了检出率低、周期长的问题，但由于假阳性率高，不能正确指导临床实践。因此国家卫生部曾在1997年行文禁止将普通PCR技术用于临床诊断。 第2页/共37页第二页，共38页。 3FQ-PCR与普通PCR的区别 采用闭管检测，不需PCR后处理，并采用dUTP-UNG酶的防污染系统，扩增和检测一次同时完成。不需开盖，不产生污染。 避免了假阳性。 探针与被检DNA序列特异杂交， 增强了特异性。第3页/共37页第三页，共38页。 4FQ-PCR与普通PCR的区别可定量结果，准确灵敏地反应了病原体的感染和治疗恢复情况。光谱分析仪直读结果，自动分析， 增强了灵敏性和客观性。第4页/共37页第四页，共38页。 5荧光基因探针杂交定量PCR技术 随着PCR技术的日臻成熟，已出现的荧光基因探针杂交定量PCR方法把目的基因扩增、特异分子杂交和荧光化学融为一体，使PCR扩增和产物分析的全过程均在单管封闭条件下进行，　并通过微机控制，实现了对扩增产物进行实时　动态检测和结果的自动分析。 第5页/共37页第五页，共38页。 6荧光基因探针杂交定量PCR技术 不仅进一步提高了特异性，并从根本上解决了PC