DB22T3357-2022玉米抗镰孢菌根腐病鉴定技术规程.docxVIP

ICS 65.020 CCS B 05 吉 林 省 地 22 方 标 准 DB22/T 3357—2022 玉米抗镰孢根腐病鉴定技术规范 Technical specification on evaluation of maize resistance to Fusarium root rot 2022 - 01 - 28 发布 2022 - 02 - 28 实施 吉林省市场监督管理厅 发 布 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分： 标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：吉林省农业科学院。 本文件主要起草人： 苏前富、贾娇、张伟、孟玲敏、白雪、王巍巍、高月波、王义生、晋齐鸣。 玉米抗镰孢根腐病鉴定技术规范 1 范围 本标准规定了玉米抗镰孢根腐病鉴定技术方法和抗性评价标准。 本标准适用于栽培玉米(Zeamays L.)自交系和杂交种等种质资源对玉米镰孢根腐病抗性的人工 接种鉴定及评价。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 镰孢根腐病 Fusarium root rot 由镰孢属的一些种(Fusarium spp.，有性态为赤霉属 Gibberella spp.) 所引起的玉米苗期根部 病害。 4 镰孢菌接种体 分离、鉴定和保存 以常规组织分离法和单孢分离法(见附录 A) 从田间采集的具有典型玉米根腐病症状的根部分离获 得纯培养物，依据形态特征和分子鉴定结果， 明确其镰孢属种级分类地位(见附录 B)， 4 ℃ 保存备 用。 制备 挑取 4.1 保存的镰孢菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基 25 ℃ 暗培养 5 d~7 d 后，用 无菌打孔器打取菌落边缘直径 5 mm 的菌饼，将其接种于合成低营养(SN) 培养基中 150 r/min 摇培 7 d~10 d，镜检分生孢子浓度达到 1 ×106 个/mL 后，充分摇匀接种于经高压灭菌的高粱粒上，每 120 g 高粱粒接种 1 mL 孢子悬浮液， 充分混匀， 25 ℃ 培养 7 d~10 d 后， 待菌丝布满高粱粒， 阴干低温 保存备用。PDA、SN 和高粱粒培养基配方见附录 C。 5 鉴定圃 设置 鉴定圃应具备良好的自然发病环境和排灌设施，周边应设置保护行。鉴定圃确定后不应随意更换。 试验设计 鉴定圃中每 2 行 (行长 5 m，行距 0.6 m~0.7 m ) 为一个小区，随机排列或顺序排列。每 30 行~ 50 行鉴定材料设 1 组对照材料(高抗自交系吉 842、高感自交系 LN 810) ，见附录 D。 种植要求 根据鉴定材料生育期、土壤环境及气候条件等适当早播。每行播种 50 粒种子， 精量点播。鉴定材 料出苗率低于 60% 时视为该材料鉴定无效。 9 接种 时期与方法 播种时将按 4.2 制备的接种体与种子同时施入播种穴中， 每穴约 5 g 接种体。 田间管理 播种后镇压保墒，正常田间管理。播种后若遇持续干旱，应及时浇灌，保持土壤含水量 60%~70% 。 L 调查 时间 玉米 4 叶~6 叶 期进行调查， 同批次接种材料应在同一天完成。 方法 全小区调查， 以玉米主胚根 2/3 以上发生腐烂为发病植株。记录每份鉴定材料的总株数和发病株 数,计算发病株率。按公式(1) 计算发病株率： P = × 100 ······································································ (1) 式中： P——发病株率，单位为百分率(%)； n——发病株数，单位为株； N——调查总株数， 单位为株。 病情分级 病情分级及相对应的植株发病株率描述见表 1。 表1 玉米对镰孢根腐病抗性鉴定的病情级别划分 病情级别 描 述 1 发病株率 0%~10%； 3 发病株率 10.1%~20%； 5 发病株率 20.1%~ 40.0%； 表1 玉米对镰孢根腐病抗性鉴定的病情级别划分 (续) 病情级别 描 述 7 发病株率 40.1%~60.0%； 9 发病株率 60.1%~100%。 8 抗性评价 有效性判别 当鉴定圃中高感对照材料达到表 1 中的 9 级，该批次材料苗期根腐病鉴定结果视为有效。 评价 8.2.1 依据鉴定材料发病程度(病情级别) 确定其抗性水平， 评价标准见表 2。 表2 玉米对镰孢根腐病抗性的评价标准 病情级别 抗 性 1 高抗 Highly resi