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- 2023-03-21 发布于广东
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多聚酶链式反应 扩增片段;一、实验目的 ;二、实验原理 ;PCR的基本原理;(二) PCR的反应过程;;三、实验材料、器材及试剂 ; PCR反应体系的五要素:
引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
Taq DNA聚合酶
来自水生栖热菌 Thermus aquaticus
良好的耐热性
Mg2+依赖性
无校读功能;dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(三磷酸脱氧核糖核苷)的缩写。是包括dATP, dGTP, dTTP, dCTP,dUTP等在内的统称,N代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA、RNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR、Real-time PCR)中 ;;无菌薄壁管中顺序加入反应体系各成分: 双/三蒸水 ?l
10×缓冲液 2.5 ?l
25mmol/L Mg2+ 2.5 ?l 4× dNTP 2.0 ?l 50umol/L引物1 2.0 ?l 50umol/L引物2 2.0 ?l 模板DNA 1-2 ?lTaq DNA多聚酶 1.0 ?l 25.0 ?l
轻弹管壁,使各成分充分混匀!
;实验操作(2);操作提示;2.PCR产物的检测 ;
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