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金巯基超分子多肽技术规程 1. 范围 本文件规定了金巯基超分子多肽技术规程的制备技术要求，生产工艺及详细的制备方 法。 本文件适用于针对多肽类活性分子的超分子自组装递送系统。 2. 规范性引用文件 本文件无规范性引用文件 3. 金巯基超分子多肽 Au sulfydryl supramolecular peptide 4. 超分子多肽简介 本文件中金巯基超分子多肽 （Supramolecular polypeptide）为分子式为 [Peptide-S-Au(I)］ 的超分子多肽，其结构式见图1.n 图1 超分子多肽结构式 5. 超分子多肽生产工艺 5.1 Au-肽超分子多肽生产工艺1注 a)将多肽溶解在NH-PEG-SH水溶液中，超声至多肽完全溶解，然后依次加入羟乙基哌2 嗪乙烷磺酸和金加热搅拌反应至溶液由黄色泛白，得到Au-肽前体； b)将羟乙基哌嗪乙烷磺酸、金、水混合加热搅拌至溶液变成紫红色，得到纳米金溶液； c)将步骤1所述Au-肽前体与步骤2的纳米金溶液混合加热搅拌，反应5-10 min后， 最后加入适量的防腐剂，即得到超分子多肽。详见图2。 注：所有的生产工艺均严格按照化工行业标准执行。 图2 Au-肽前体超分子多肽生产工艺流程图 4 5.2 Au-多肽-SH超分子多肽生产工艺2注 a)将金、多肽-SH 的水溶液混合； b)用氢氧化钠(或碳酸氢钠溶液、柠檬酸钠、柠檬酸钾)调节步骤1溶液的pH值，使之 保持在6.0-7.0之间； c)加入维C抗坏血酸，25℃下搅拌反应1h，最后加入适量的防腐剂，制备得到超分子 多肽。详见图3。 注：所有的生产工艺均严格按照化工行业标准生产规范执行。 图3 Au-多肽-SH混合超分子多肽生产工艺2流程图 6. 超分子多肽定量制备方法 6.1 Au-肽超分子多肽定量制备方法 1 a)将2mg多肽溶解在NH2-PEG-SH水溶液 （4mg/mL）中，超声至多肽完全溶解，然后依 次加入羟乙基哌嗪乙烷磺酸和金加热搅拌反应至溶液由黄色泛白，得到Au-肽前体； b)将 100 mM羟乙基哌嗪乙烷磺酸(pH 7.0)、10mM金、水混合加热搅拌至溶液变成紫红 色，得到纳米金溶液； c)将步骤1所述Au-肽前体与步骤2的纳米金溶液混合在50℃加热搅拌，反应5-10min 后，最后加入适量的防腐剂，即得到超分子多肽。 6.2 Au-肽超分子多肽定量制备方法2 a)将 10mM金、多肽 （末端修饰巯基）（0.2mg/mL）的水溶液混合； b)用6M氢氧化钠 （或碳酸氢钠溶液、柠檬酸钠、柠檬酸钾）调节步骤1溶液的pH值， 使之保持在6.0-7.0之间； c)加入0.1M维C抗坏血酸，25℃下搅拌反应 1h，最后加入适量的防腐剂，制备得到超 分子多肽。 5