蛋白质糖类脂质的实验鉴定[1].pptVIP

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还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定实验 1、熟悉实验的一般过程 (1)了解实验原理 (2)熟悉实验材料、试剂和器材 (3)了解实验的操作过程 实验操作的原则:编号原则、对照原则、单一变量原则、等量原则。 (4)实验结果的观察(根据实验现象得出) (5)实验结论( 即实验原理) 2.鉴定生物组织中糖类 问题导学: 1.鉴定淀粉的试剂?产生的颜色反应? 2.鉴定还原糖的试剂?操作方法?颜色反应? (1)实验原理 糖类 淀粉+碘→蓝色 还原糖+斐林试剂 50~65℃水浴加热 约2 min 砖红色沉淀 2.鉴定生物组织中糖类 (2)实验的材料、试剂 蔗糖、淀粉、唾液淀粉酶、稀碘液、斐林试剂 (3)实验的一般步骤 鉴定淀粉 类 别 糖 类 碘液/滴 颜色反应 A 管 B 管 蔗 糖 淀 粉 等 量 等 量 无颜色变化 紫色变成蓝色 还原糖的检测和观察(方法一) 选材:含糖量较高、白色或近于白色的植物组织 结论:组织样液中有可溶性还原糖 (3)实验的一般步骤 (3)实验的一般步骤 鉴定还原糖(方法二) 类 别 糖 类 斐林试剂/ml 颜色反应 C 管 D 管 蔗糖+清水 淀粉+清水 无颜色变化 2ml 2ml 2ml E 管 淀粉+淀粉酶 无颜色变化 砖红色沉淀 还原糖实验讨论: 1、选择富含还原糖的白色或浅色的植物组织。 举例说明? 在还原糖的鉴定过程中,能否选用西瓜、甘蔗、甜菜作 为实验材料,为什么? 2、试验中体现哪些原则? 3、斐林试剂的组成及使用方法? 4、还原糖鉴定中颜色的变化? 斐林试剂不稳定,应现用现配 蓝色到棕色到砖红色沉淀 例1:下列关于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解作用实验原理的叙述中,不正确的是 A.淀粉和蔗糖都是非还原糖,在加热条件下与斐林试剂作用不产生砖红色沉淀 B.淀粉能在淀粉酶的催化下水解成还原糖 C.蔗糖能在淀粉酶作用下水解成还原性葡萄糖和果糖 D.淀粉酶能否催化淀粉和蔗糖的水解,是通过有无还原糖特定的颜色反应来证明的 例2.下列关于斐林试剂的使用方法及现象中,正确的是 A.先向组织样液中加入甲液,混合均匀后再加入乙液 B.先将甲液与乙液混合均匀后,放置若干天再使用 C.斐林试剂与双缩脲试剂中的硫酸铜浓度不同,使用方法相同 D.将斐林试剂与组织样液混合均匀,水浴加热后出现砖红色沉淀 3.鉴定生物组织中脂肪 问题导学: 1.脂肪鉴定的原理? 2.含有脂肪的生物组织? 3.鉴定脂肪时,所用酒精的作用? (1)实验原理 脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ染液→红色 3.鉴定生物组织中脂肪 (2)实验材料、试剂 洋葱根尖、核桃种子、苏丹Ⅲ染液、苏丹Ⅳ染液、 50%酒精 (3)脂肪的检测和鉴定 方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色 方法二: 取材:花生种子(浸泡),将子叶削成薄片 结论:花生种子中有脂肪存在 脂肪的鉴定中,实验用的花生种子需提前浸泡3~4 h, 浸泡时间太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,切下的薄片不易成形。 例3、用苏丹III染液对脂肪组织进行染色时,可用来冲洗浮色的药品是 A、HCl      B、H2O     C、50%的酒精     D、无水酒精 例4、下列哪个实验用到显微镜  A、可溶性还原糖的鉴定 B、蛋白质的鉴定  C、脂肪的鉴定  D、淀粉的鉴定 问题导学:1.鉴定蛋白质的实验原理 2.蛋白质试剂的配制方法 3.双缩脲试剂与斐林试剂的区别 4.鉴定生物组织中蛋白质 (1)实验原理 蛋白质+双缩脲试剂→紫色 4.鉴定生物组织中蛋白质 (2)实验材料、试剂 鸡蛋清、牛奶、双缩脲试剂 (3)蛋白质的检测和观察 选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液  结论:组织样液中存在蛋白质 在蛋白质的鉴定实验中,如果用蛋清稀释液作为实验材料,一定要稀释到一定程度,否则,与双缩脲试剂 发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试 管也不易洗刷干净. 斐林试剂与双缩脲试剂的比较 斐林试剂 双缩脲试剂 鉴定成分 还原糖 蛋白质 鉴定原理 还原糖中的醛基(—CHO)在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2+还原成Cu+,从而生成砖红色的Cu2O沉淀 双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)在碱性溶液中能与Cu2+结合生成紫色络合物,蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键 斐林试剂 双缩脲试剂 试剂浓度 甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液; 乙液:质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液 A液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液; B液:质量浓度

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