四川省血站、浆站实验室质量管理培训班 4-谭太昌：医用酶标仪和洗板机的性能评价和校准.pptVIP

cccc 医用酶标仪和洗板机的性能评价和校准 四川省医学科学院·四川省人民医院谭太昌 背景 酶标仪已经是各医疗机构实验室开展酶联免疫实验的标准设备配置。酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。 相关的检验质量控制机构对酶标仪的使用和校验和其他的大型检验设备一样有专门的规定和要求。 ISO/DIS 15189.2 – 2002 医学实验室—质量和能力的具体要求5.3 实验室设备中有描述 5.3.2 应证实设备在安装时以及在常规应用中，能达到所要求的性能指标，并且符合相关检验所要求的条件。实验室管理层应建立一套程序，用于定期检测并证实设备、试剂、分析系统等经过了适当校准并处于正常功能状态。同时还应有记录并归档的预防性维护程序（见4.2.5），该程序至少应遵循制造商的建议。 如果有制造商的使用说明、操作手册或其它相关文件，可酌情使用这些资料建立符合相关标准的要求，明确校准周期，以满足本款的部分或全部要求。 5.3.9 只要可行，实验室控制的需校准或检定的设备，应贴以标签或以其它方式标明该设备的校准或检定状态，并标明再次校准或检定的日期。 5.3.10如果设备脱离实验室直接控制，或已被修理、维护过，该设备在实验室中重新使用之前，实验室应对其进行检查，并确保其性能已达到要求。 临床实验室管理办法 第十七条 实验室应当对需要校准的检验设备、检测系统和对检验结果有影响的辅助设备定期进行校准。 [注释]：检验设备的校准对保证检验结果的准确、可靠十分重要，因此对检验结果有影响的各类检验设备必须有校准计划，特别是大型检验仪器。根据不同仪器及工作情况不同，应规定： 1.校准日期间隙。如日校准、月校准、季校准、年中校准、年校准及特殊情况下的校准（如出现故障维修后，检测结果失控时等情况）。 2.规定校准方（本实验室校准、厂方校准、计量、检定单位校准等）；3.如本实验室校准，要规定所使用的校准品（应使用同一检测系统的校准品）、校准方法；4.验收标准等。不论何方标准，必须有完整的校准记录（含标准后的各种数据）。 国家规定强制性检定的仪器（如天平、分光光度计等）必须有当年检定的合格证书。 所有必须检定校准的仪器及用具必须全部检定（或校准），不得抽检（如定量加样器）。 各种对检验结果有影响的辅助设备如压力表、温湿度计、电导仪等等也需要定期检定或校准，并有记录。 由以上文件的要求可以得到以下的信息： 酶标仪的投入使用前必须经过性能评价，各项性能指标至少达到生产厂家的说明。 酶标仪在使用中必须要有使用、维护、维修记录。 酶标仪在使用中必须有定期校验计划，一般为一年。校验可由实验室自己进行、生产厂家进行、计量检定机构进行。 酶标仪性能评价 评价内容： 一般应包含以下内容： 1.滤光片波长准确度检测，用紫外分光光度计对酶标仪所用的滤光片进行光谱扫描，检测值与标示值之差即为滤光片精度，其差值越接近于零且峰值越大表示滤光片的质量越好，波长精度越高。 2.灵敏度和准确度评价，方 法 ⑴灵敏度： 精 确 配 制6ug/ml 重铬酸钾溶液,加入200ul重铬酸钾溶液于微孔中，于450nm（630）测定，其吸光度应≥0.01A。⑵准确度：准确配制1mmol/L对硝基苯酚水溶液，然后以10mmol/L氢氧化钠溶液25倍稀释，加入200ul对硝基苯酚溶液于微孔中，于405nm（630）测定，其吸光度应在0.40A左右。目的是检测滤光片和检测器的质量。 3.精密度评价 :每个通道在三个微孔中分别加入200ul高、中、低三种不同浓度的甲基橙溶液，采用双波长（492nm.630nm)作双份平行测定，每日测定两次，连续测定20天。分别计算批内精密度、日内批间精密度、日间精密度和总精密度及相应的CV%。 4.线性评价 因为酶联免疫实验可用于定性和定量实验，故对酶标仪的线性也有相应的要求。方法：准确称取甲基橙配制成5个以上系列浓度的溶液，采用双波长平行检测8次求其均值，计算回归方程，相关系数r及标准估计误差Sy,x 。 5.通道差和孔间差评价。 5.1 通道差检测：取一只微孔板小孔杯以酶标板架为载体，分别加入三种不同浓度的甲基橙溶液200ul先后置于8个通道的相应位置，双波长测定（490，630nm），连续测三次观察其不同通道之间测量结果的一致性并用极差来表示其通道差。 5.2 孔间差检测：选择一块空白酶标板（8x12孔）分别加入甲基橙溶液200ul，先后置于同一通道双波长测定，其误差大小用±1.96s衡量。 6.零点飘移 是评价仪器在一定时间内零点吸光度的变化趋势，与波长无关，它间接地反映了仪器内部检测系统在单位时间内处于工作状态下的稳定性及仪器的机械性能情况（连续进板、检测、退出），故它是评估仪器内部