石蜡切片机手动、半自动和自动切片类型简介.docxVIP

— — PAGE 1 — 石蜡切片机手动、半自动和自动切片类型简介  Leica有多种型号的石蜡切片机。常规石蜡切片有手动、半自动和电动之分。价格也成梯度。 问:那在选切片机的时候，要不要选一款电动的呢？目前，国内外大多数的科研工作者都以切片机预设的切片厚度值作为组织切片真实厚度的默认值，很少有人探究组织切片厚度的变化可能会对观察和评测结果造成多大影响。 实际中，同一组织样本不同厚度的切片在显微镜下观察时，薄组织切片的颜色往往淡于厚切片，如果以镜下观察的颜色深浅来定性判断被检测化学物质 （包括抗原或抗体）的有无，则可能因为组织切片较薄而被认为是阴性的结果。 同时，组织切片较薄、颜色太浅不但对组织细胞形态结构和化学物质的定位观察产生影响，而且更会因为切片厚度的不恒定，可极大地动摇定量分析结果的可靠性。 即使在恒定切片机厚度刻度值的条件下手动切片，同一组织切片内及相邻的组织切片之间也常会出现肉眼可见的表现为颜色深浅不一的厚度差异。 切片厚度受制片过程中多种因素的影响，例如：切片刀的锋利程度、切片时的环境温度、切片的速度、石蜡的熔点和硬度及韧性等。 下面就手动和自动两种切片的厚度差异在这里做个介绍，这种差异的结果是经采用二次包埋法进行重切片，用图像分析仪测量组织切片的实测厚度，观察组织切片实测厚度的变化而得出的，其可为组织、细胞的形态结构和化学物质的定性与定位观察及定量分析结果的评价提供参考。 1、分析结果显示：手动和自动切片对组织切片的实测厚度有显著性差异（p0.05）组织种类对组织切片的实测厚度无显著性差异 （p0.05）。 2、各组织切片的厚度测量均值均较切片机预设厚度值大，同一切片机预设厚度值条件下，自动切片的实测厚度均值均小于手动切片，且更接近切片机预设刻度值。 3、相同组织的组织切片实测厚度的极端离散趋势 （极差）随切片机预设厚度值的增加而呈现上升趋势，且手动切片组的极差大于自动切片组，但两组之间的极差比较尚没有统计学意义。 4、尽管石蜡包埋组织切片的制备方法已得到不断的改良定型，但是，切片机预设的切片厚度值与组织切片的实测厚度值间的差异情况仍不能为人们所忽视，它对评判组织细胞结构的形态和化学物质 （包括抗原或抗体）有无和多少将产生影响，应引起高度的重视。 5、切片机预设的切片厚度刻度值与组织切片的实测厚度值之间有10%以上的差异，切片机标示厚度与实测厚度间的平均误差为17.2%。  结论： 实验获得的组织切片厚度变化的研究结果表明切片机的切片厚度预设值低估了石蜡包埋组织切片的真实厚度，实验切片机预设切片厚度与手动和自动切片厚度相差较大。 其主要原因是由于切片机作自动切片时其切片的速度恒定，石蜡包埋的组织受力均匀，而手动切片时的切片速度难以恒定，致使石蜡包埋的组织受力不均匀，切片机的使用年限越久，活动机械连接的间隙越大，产生实际切片的厚度大于或小于切片机预设切片厚度的机会越大。 如使用的切片机为全新的，则实测切片厚度均大于而不小于切片机预设切片厚度，而使用年久的手动切片机，其实测切片的厚度有不少小于切片机预设切片厚度，这与上述分析相吻合的。  实际操作表明全自动切片机的切片速度快慢的设置与切片机轮转速度有关，但对石蜡包埋组织蜡块切片瞬间的速度并未产生明显影响。 手动切片的速度是以操作者个人主观感觉来控制的，难以保证恒定的切片速度，其组织切片间厚度的差异更大，这与实验结果的极差是相符的。 通过观察组织切片厚度的变化，发现不同切片方法对组织切片真实厚度有影响，自动切片的组织薄片的实测厚度与预设厚度刻度值的差异小于手动切片，自动切片获得的组织切片的精度更高，优于手动切片。 因此，石蜡切片机的手动、半自动和自动切片机究竟该怎么选呢？只要条件允许，尽量选择一款优质的全电动切片机！