光计显色反应及应用.pptxVIP

第1页/共56页光计显色反应及应用第2页/共56页（一）基本组成光源单色器样品室检测器显示器1. 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。第3页/共56页 2.单色器 将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅 第4页/共56页3. 样品室 样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。第5页/共56页比色皿规格：0.5cm、1cm、2cm、3cm手拿：毛玻璃面清洗：CH3OH∶HCl = 2 ∶1水 蒸馏水 试液注意：绝对不能用洗液、毛刷、去污粉第6页/共56页4. 检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。5. 结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理第7页/共56页仪器 可见分光光度计第8页/共56页仪器 紫外-可见分光光度计第9页/共56页§2-4 显色与测量条件的选择1、显色反应2、显色反应条件的选择3、测量条件的选择4、提高光度测定灵敏度和选择性的途径第10页/共56页一、显色反应首先 显色 有色化合物 测定 使无色或浅色的待测组分转变为有色化合物的反应称为显色反应。与待测组分形成有色化合物的试剂成为显色剂。第11页/共56页如 Mo5+ + 5CNS-Mo（CNS）5 桔红色 Fe3+ + CNS- Fe（CNS）2+ 血红色显色反应可以是络合反应、氧化还原反应、有机合成反应等目的：提高分析的灵敏度和准确度第12页/共56页1、原则：（1）、显色反应的灵敏度要高（2）、显色剂的选择性要好（3）、有色化合物的稳定性要高（4）、有色化合物的组成要恒定（5）、显色剂本身的颜色与有色化合物的颜色差别要大 要求△? 60nm。第13页/共56页2.显色剂 无机显色剂：硫氰酸盐、钼酸铵、过氧化氢等应用不多，因为配合物不够稳定，灵敏度及选择性也不高。 有机显色剂：种类繁多 M +有机显色剂 螯合物 （大多数） 特征颜色 极稳定 第14页/共56页有机显色剂的选择性、灵敏度均较高。生色团：含不饱和键的基团，能吸收＞200 nm 波长的光 广义生色团 如： N=N C=O N=O （偶氮基） （羰基） （亚硝基） C=S N （硫羰基） （硝基）OO第15页/共56页助色团：含孤对电子的基团，与生色团上的不饱和键相互作用 颜色加深 如：NH2R2N OH第16页/共56页 例：1、磺基水扬酸 很多高价金属离子 螯合物，主要用于测定Fe3+ Fe3+ + FeSal+ 红褐色 pH 2~3 Fe(Sal) 2 - Fe(Sal) 3 3- Fe(OH)3 褐色 黄色 沉淀 pH 4~9 pH9~11.5 pH＞12 FeSal+ λmax= 520nm ε=1.6×103第17页/共56页 2、丁二酮肟 测 Ni 2+ 十分有效的试剂 Ni 2+ + 红色配合物 λmax = 470 nmε= 1.3×104过硫酸铵 第18页/共56页 3、邻二氮菲 （邻菲啰啉 、邻二氮杂菲） 测 Fe2+ 较好的试剂 Fe2+ +橙红色 pH 3~9λ max = 508 nmε= 1.1×104第19页/共56页 4、二苯硫腙 测 Cu2+、Pb2+、Zn2+、Cd2+、Hg2+ 等重金属离子的重要试剂 采用控制酸度及掩蔽的办法，可消除重金属离子之间的干扰，反应的灵敏度是很高的。 Pb2+ +红褐色 λ max = 520 nm ε= 6.6×104第20页/共56页二、显色反应条件的选择影响显色反应的内因，决定于离子的本性及显色剂的结构和性质。外因：显色条件1.显色剂用量 M + R MR 被测离子 显色剂 有色化合物 K = ∴［MR］ ［MR］ = K ［R］ ［M］ ［R］ ［M］ 第21页/共56页吸光度A与显色剂用量CR的关系会出