哈尔滨工程大学《分子生物学》课件-第2章有机体、基因和染色体.pptVIP

1986年，Gottschling和Zakian从尖毛虫的营养核中分离出两种端粒蛋白，一种为55Kd，另一种为26Kd，它们与端粒牢固地结合。当用高浓度盐溶液将所有的组蛋白从染色质上解析出来，而端粒蛋白仍然与端粒DNA结合着。 这两种蛋白质保护了大约100bp的双链末端和16bp的单链尾巴。这种结合并不是共价结合，仍然依靠氢键及范得华力与DNA结合。这种端粒蛋白的结合，既需要端粒双链部分的正向重复序列，又需要3’末端的单链序列，否则结合能力急剧下降。 端粒的功能 保持染色体的稳定 使线形DNA的顺利复制 影响染色体的行为 可能控制细胞的寿命 和核骨架的组成有关 生命衰老是一个非常复杂的进程，它有许多不同的影响因素，端粒仅仅是其中之一 。 六、真核生物染色体上的单一序列和重复序列及卫星DNA 1 单一序列：在一个基因组中只有一个拷贝，真核生物的大多数基因在单倍体中都是单拷贝的。 2 重复顺序（短片段）可分为三种类型： （1）正向重复(direct repeats)又叫顺向重复； （2）反向重复(inverted repeats) ； （3）回文顺序 (Palindromic sequence) 5‘ GTGAGCTCAC 3’ 3’ CACTCGAGTG 5’ 按重复序列的重复程度分为： （1）轻度重复序列：在一个基因组中有2~10拷贝。 （2） 中度重复序列：10~几百拷贝。中度重复序列一般是不编码的序列，一般是在基因调控中起重要作用，包括开启或关闭基因的活性，促进或终止转录，DNA复制的起始等。这种重复序列的平均长度大约为300bp。常有数千种像这样的重复序列，每一种平均重复数百次。 a）串联重复序列：指许多个重复序列以串联形式排列在一起，包括微卫星DNA、小卫星DNA、核糖体DNA。 微卫星DNA序列，又称短串联重复序列或简单重复序列，是由2-4个碱基组成，常见以（AC）n和（TG）n二聚核苷酸为重复单位，重复次数为10-60次，总长度小于去150bp，可分布在整个基因组的不同位置，由于等位基因间重复次数不同导致其在动植物中具有很高的多态性。 小卫星DNA由重复单位（15-400bp，平均长度20bp）串联重复而成，拷贝数从10-10000，一般为1000-5000。主要分布在染色体的近端粒处，也称为数目可变串联重复序列（variable number of tandem repeat，VNTR）。 核糖体DNA基因编码细胞质中18S、5.8S和28S核糖体RNA的基因，也称rDNA,是真核生物中一类高度重复的串联DNA重复序列，集中分布在一个或数个位点，大都与核仁组织区相联系。 b）散在重复序列：与其它无关重复序列或单拷贝序列相间排列。 在大多数真核生物基因组中，多数中等重复序列是可移动遗传因子，也称为转座子。 一段DNA顺序可以从原位上单独复制或断裂下来，环化后插入另一位点，并对其后的基因起调控作用，此过程称转座。 这段序列称跳跃基因或转座子，可分插入序列（Is因子），转座（Tn），转座 phage 。 转座(因)子是基因组中一段可移动的DNA序列，可以通过切割、重新整合等一系列过程从基因组的一个位置“跳跃”到另一个位置。 这种转座因子带有同转座无关的一些基因，它的两端就是IS，构成了“左臂”和“右臂”。两个“臂”可以是正向重复，也可以是反向重复。这些两端的重复序列可以作为Tn的一部分随同Tn转座，也可以单独作为IS而转座。 这些两端的重复序列可以作为Tn的一部分随同Tn转座，也可以单独作为IS而转座。Tn两端的IS有的是完全相同的，有的则有差别。当两端的IS完全相同时，每一个IS都可使转座子转座；当两端是不同的IS时，则转座子的转座取决于其中的一个IS。 Tn有抗生素的抗性基因，Tn很容易从细菌染色体转座到噬菌体基因组或是接合型的质粒。因此，Tn可以很快地传播到其他细菌细胞，这是自然界中细菌产生抗药性的重要来源。 转座子转座插人宿主DNA时，在插入处产生正向重复序列，其过程是这样的：先是在靶DNA插入处产生交错的切口，使靶DNA产生两个突出的单链末端，然后转座子同单链连接，留下的缺口补平，最后就在转座子插入处生成了宿主DNA的正向重复。 已知的转座因子的转座途径有两种：复制转座和非复制转座。 1．复制转座(replicativetransposition)转座因子在转座期间先复制一份拷贝，而后拷贝转座到新的位置，在原先的位置上仍然保留原来的转座因子。复制转座有转座酶(transposase)和解离酶(resolvase)的参与。转座酶作用于