哈尔滨工程大学《分子生物学》课件-第7章原核调控.pptVIP

经过修饰的α亚基使核心酶对寄主σ亚基的亲和力下降，对T4基因所编码的蛋白Mot的亲和力提高。 Mot取代原来的σ亚基，降低了RNA聚合酶对寄主基因和T4本身第一批早期基因的识别能力。 在转录晚期基因时，RNA聚合酶已被高度修饰：两个α亚基分别结合了一个ADP-核糖基，另外还有四个蛋白因子结合于酶分子。这种现象称为超修饰（supermodified）。 四、RNA聚合酶的代换 T7噬菌体的时序调控根据自身的感染特点采用了RNA聚合酶的代换来进行。 由以上可以看出，T7首先时利用寄主的RNA聚合酶转录产生自身的RNA聚合酶及蛋白质激酶，自己的RNA聚合酶又用来转录产生寄主RNA聚合酶的抑制剂，从而完全关闭了寄主的转录体系，建立了自己的转录体系。 这些事例都说明转录水平的调控是最主要和最重要的调控机制。 第五节 以翻译方式来控制基因转录—— 衰减子系统 色氨酸操纵子 1.结构 2.特点: (1) trpR(89’)和trpABCDE(25’)不连锁； (2) 操纵基因在启动子内 (3)启动子和结构基因不直接相连，二者被 前导顺序(Leader)所隔开 (4)有衰减子(attenuator) 调节 (1) Trp作为辅阻遏物(corepressor) (2)阻遏物和 RNA pol 在P,O重叠区产生竞争性抑制； (3)阻遏物的阻遏能力低，是LacR的1/千； (4) trpO调节合成代谢，存在衰减作用。 衰减作用 1978年yanofsky发现前导序列（leader sequence） Attenuation?(衰减)：控制一些细菌启动子表达中涉及的转录终止调控。? Attenuator?(衰减子)：衰减发生处的一种内部终止子序列。 衰减作用：原核生物中通过翻译前导肽而实现控制DNA的转录的调控方式。 ? 在trp mRNA 5端trpE基因的起始密码前有一个长162bp的mRNA片段被称为前导区，研究发现，当mRNA合成起始以后，除非培养基中完全没有色氨酸，转录总是在这个区域终止，产生一个仅有140个核苷酸的RNA分子，终止trp基因转录。 分析前导肽序列，发现它包括起始密码子AUG和终止密码子UGA，编码了一个14个氨基酸的多肽。该多肽有一个特征，其第10位和11位有相邻的两个色氨酸密码子。正是这两个相连的色氨酸密码子（组氨酸、苯丙氨酸操纵子中都有这种现象）调控了蛋白质的合成。 前导序列中有4个富含GC片断，以两种不同的方式进行碱基配对，有时是1－2和3－4配对，有时只以2－3方式配对。 衰减子（attenuator）：细菌E.coli的trp操纵子中第一个结构基因与启动序列P之间有一衰减子区域。Trp操纵子的序列1中有两个色氨酸密码子，当色氨酸浓度很高时，核蛋白体（核糖体）很快通过编码序列1，并封闭序列2，这种与转录偶联进行的翻译过程导致序列3、4形成一个不依赖ρ（rho）因子的终止结构---衰减子。 转录衰减是原核生物特有的调控机制。  原核生物转录、翻译偶联 图15-8 高Trp时： Trp-tRNATrp 存在 核糖体通过片段1(2个Trp密码子) 封闭片段2 片段3，4形成发夹结构 类似于不依赖ρ因子的转录终止序列 RNA聚合酶停止转录,产生衰减子转录产物 转录、翻译偶联,产生前导肽 低Trp时： Trp-tRNATrp 没有供应 核糖体翻译停止在片段1 （2个Trp密码子） 片段2，3 形成发夹结构 转录不终止 RNA聚合酶继续转录 除了Trp操纵子外，其他许多负责氨基酸的操纵子都受衰减子的调控 细菌演化出衰减子调控系统的生物学意义可能是： ①活性阻遏物和非活性阻遏物的转变可能较慢，而tRNA荷载与否可能更为灵敏； ②氨基酸的主要用途是合成蛋白质，因而以tRNA荷载情况为标准来进行控制可能更为恰当； ③为什么大多数操纵子又同时需要阻遏蛋白呢？ 因为衰减子系统需要先转录出前导肽mRNA，然后根据前导肽的翻译情况来决定mRNA是否继续转录，而当氨基酸含量丰富时，则无需转录而关闭mRNA的转录活性。 也就是说，需要一个决定基础水平的控制系统，当细胞内氨基酸高于某一水平时，可通过阻遏蛋白，而只有低于这一水平时，才需要用衰减子进行精细调节。 第六节 翻译的调控 转录水平的调控是最主要的，也是最经济，最有效的方式。但转录生成mR