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人巨细胞病毒pp抗原检测;* 人巨细胞病毒(CMV)感染甚为普遍
* 人巨细胞病毒(CMV)感染是免疫功能低下者的常见机会感染
* 器官移植后活动性HCMV感染率为20-70%,如发生CMV肺炎,死亡率可达80-90%
* CMV还有抑制机体免疫功能的作用,CMV感染可增加真菌和其他机会感染发生率,
* 还可能造成异基因移植物的损害。
* 目前对器官移植后CMV病的重点是预防,包括预防性抗病毒或针对CMV亚临床感染(Preemptive)抗病毒治疗治疗
。
; ; 研究目的
了解HCMVpp65抗原检测在免疫功能低下者临床HCMV疾病预测或早期诊断中的价值。
了解HCMVpp65抗原检测在监测疾病活动性和指导CMV““亚临床感染抗病毒”治疗中的价值。
应用HCMVpp65抗原检测分析免疫抑制病人CMV感染的危险因素
;
试验原理
用免疫荧光标记的单克隆抗体检测CMV的低基质磷蛋白 pp65。
pp65的特点
* CMV病毒复制的早期蛋白,它出现于病毒感染的早期,在细胞感染后3-4小时即开始出现
* 是CMV病毒含量最丰富的蛋白
* 其功能是将病毒的DNA锚定在受感染细胞的核膜上
* 在胞浆的高尔基体内合成,然后运回核内。
; CMV PP65抗原血症检测
(一)分离白细胞及制片
(二) 固定和打孔
(三) 免疫荧光染色
(四)、读片和结果判断
;第7页/共37页;第8页/共37页; 试验结果;第10页/共37页;第11页/共37页;第12页/共37页;第13页/共37页;第14页/共37页;第15页/共37页;第16页/共37页;第17页/共37页;第18页/共37页;第19页/共37页;第20页/共37页;第21页/共37页;第22页/共37页;第23页/共37页;第24页/共37页;讨论
一pp65抗原血症检测
直接检测病毒蛋白的方法不受机体免疫功能的响,在检测免疫抑制病人的CMV活动性感染时尤其有用.
其检出率明显高于血清学方法
特点为快速(手工操作4-5小时)、敏感性高(活动性感染80-90%,CMV病99-100%)和较高的特异性(77-95%)、可以定量测试
用其指导治疗明显降低了死亡率
;
在骨髓移植中,可在发病早期诊断,亚临床感染的检出率偏低,应寻求更好的预测方法,或调整诊断标准
不能检测新毒株和抗原决定簇有变异的毒株
治疗后抗原血症转阴的病人少部分会复发,应结合更好的监控疗效的方法;;第28页/共37页; PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用 2
- 骨髓移植后CMV感染的危险因素
CD34+细胞分选
GVHD(FK506)
TBI
合并其他病原体感染
;PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用3
--治疗时间
细胞数多者和少者症状性感染的发病率是相近的
90%的症状性感染首次阳性抗原血症的PP65阳性细胞数 10个/1.5×10?(1-7)
我们认为这组病人只要发现阳性细胞即应治疗
;;PP65在监测自身免疫病病人CMV感染中的应用
发热的自身免疫病病人出现CMV感染发病率和死亡率均很高,CMV感染可能是重要的致病原
较之白细胞减少机体免疫状态异常和这种异常未被有效控制,可能是病毒活动性复制的更主要的原因
阳性细胞数多少可以帮助判断和预测CMV症状性感染
CMV特异性IgM的阳性检出率非常低,
; CMV感染的危险因素
CMV感染组DRI评分大多20
合并细菌或感染
病程长、未正规治疗的狼疮
;三 PP65检测在监测血液肿瘤化疗后和再障病人中CMV感染中的应用
; 结论
人巨细胞病毒pp65白细胞抗原血症检测可作为免疫功能低下者活动性CMV感染或HCMV疾病的预测指标
骨髓移植后或激素冲击/化疗后发热患者PP65抗原血症出现开始抗病毒治疗可明显降低死亡率。
CMV感染与多种临床危险因素有关;第36页/共37页;谢谢观看!
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