实验动物学实验报告.docxVIP

PAGE PAGE 10 实验动物学课程 实验报告 实验内容： 小鼠的基本实验操作 小鼠皮肤移植试验、睾丸（或卵巢）摘除术 豚鼠和兔的一般操作技术 大鼠实验的基本操作 大鼠性周期观察和大鼠急性肺水肿模型建立 小鼠无菌取胎术 Beagle 犬的一般操作和沙鼠、金黄地鼠、裸小鼠的特性 实验一 小鼠的基本实验操作 一、实验目的 : 通过实际操作，掌握小鼠的一般操作方法，包括小鼠的抓取和固定、性别鉴定、编号、去毛、给药、采血、麻醉、处死，尤其是染色法编号、灌胃、眼球摘除法采血、腹腔注射、脊椎脱臼法处死。 二、实验动物： 昆明小鼠 4 只（ 2 雌 2 雄） 三、实验步骤 1、 抓取和固定 2、 性别鉴定 3、 编号（染色法） 4、 去毛（脱毛剂法） 5、 给药：消化道、腹腔注射、尾静脉注射 6、 采血：眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法 7、 麻醉：氯胺酮腹腔麻醉 8、 处死：脊椎脱臼法、过量麻醉 9、 解剖： 生殖系统： 雄性：睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺（在膀胱下方，胶质状，透明） 雌性：双角子宫、卵巢 肾上腺、胰腺、胆囊、甲状腺四、实验结果 1、抓取和固定： 抓取：抓小鼠的尾根部 固定：抓住小鼠的尾根部，让小鼠在粗糙平面上爬行，后拉尾跟部，右手的拇指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤，小指和无名指将尾巴固定在手掌面。 2、 性别鉴定： 观察肛门与生殖器间的距离和二者之间的毛发。雄性：距离长，毛发密（和其 他部位一样） ；雌性：距离短，毛发稀疏。 3、 编号： 染色法： 用苦味酸（黄色）在小鼠背面染色 逆毛发生长方向染色，自毛根开始 可编 1-10 号（ 10 号为不编号） 去毛：脱毛剂： 8% Na2S，自毛发根部涂抹 给药： 灌胃法：左手抓取小鼠固定后，右手持特制灌胃针，沿一侧口角进针， 紧贴咽后壁， 头后仰以便伸直消化道， 进针 2/3 后灌生理盐水 0.5ml 注射给药： 腹腔注射： 从下腹部的两侧进针 进针时针与腹部成 45°。进针后稍微晃动针， 如无粘滞感则可注射药物 尾静脉注射：一人固定小鼠，另一人用左手中指和拇指将尾拉直，食 指托住尾部，消毒后右手持带 4 号针头的注射器在图示 A（背面，实为动脉） 位置进针注射 0.5ml 生理盐水。 注射完毕拔出针头， 用无菌棉球压迫止血。 尾动脉细小，且贴近皮肤，未注射成功。 小鼠尾静脉切面图 采血 ：从眼角内侧 0.5cm 处进针。（右图） 眼球摘除法：左手抓取 用固定小鼠，右手持弯头镊在 眼球根部将眼球摘除， 头朝下， 眼眶内血迅速流出。 麻醉： 0.5%氯胺酮腹腔麻醉： 本小鼠重 25g，按 100mg/kg 的药量给药， 8 分钟麻醉成功 处死： 脊椎脱臼法：按住头部，将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死 过量麻醉：追加 0.5%氯胺酮过量（ 5ml）腹腔麻醉 解剖： 生殖系统： 雄性：寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺 雌性：双角子宫、卵巢 肾上腺：米粒大 小 胰腺：位于胃下方，类似于脂肪组织，浑浊状 胆囊：芝麻大小，浅绿色，半透明 甲状腺：紧贴环状软骨 五、实验讨论 1、小鼠抓取的感受： 小鼠性情较温顺， 一般不会咬人， 比较容易抓取固定。 通常用右手提起小鼠尾巴将其放 在鼠笼盖或其它粗糙表面上， 在小鼠向前挣扎爬行时， 用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部 皮肤， 将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部， 即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中， 如进行尾静脉注射时， 可使用特殊的固定装置进行固定， 如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。 如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作， 如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。 2、小鼠尾静脉注射感受： 首先，注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟，有利于注射；其次，先远后尽，不要一开始 就从尾根部，那样失败了不好办； 再次，进血管后注意保持稳定，针尖很容易刺穿血管的。 尾静脉就在尾巴的正左右两边， 先用酒精用力擦， 可以去掉部分角质， 然后按住近心端让充血，就很容易看到了。进针大概 1～2 厘米是最合适的。 尾静脉注射时， 可用 45~50 度的温水浸润半分钟或用酒精擦拭， 可使血管扩张， 同时也可软化表皮角质。 以左手拇指和食指夹住鼠尾， 使静脉充盈， 中指帮助无名指和小指捏住鼠尾末梢，右手持注射器（连 5 号细针头），针头与静脉夹角一般小于 30 度，从距尾尖 2 - 3 厘米处进针，此处皮薄易进入，先抽回血，见到血后再缓慢注入少量药液，如无阻力，表示 针头已进入静脉，可继续注入。一般推注速度为 0.05 - 0.10ml/ 秒，一次注入量为 0.05 - 0.25ml/10g 体重。如反复注入，应尽可能从尾末端开始，以后向尾根部方向移动注射。 实验二 小鼠皮肤移植试验、睾丸（或卵巢）摘除术 一、实