人教教学新人教高中生物选修基因工程基本操作程序.pptxVIP

人教教学新人教高中生物选修基因工程基本操作程序第1页/共29页 课题二、基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定第2页/共29页 (一)、目的基因的获取 获取目的基因是实施基因工程的第一步。可以从自然界中已有的物种中分离出来，也可以用人工的方法合成。目的基因：主要是指编码蛋白质的结构基因获取目的基因的方法：①从基因文库中获取（基因组文库，部分基因文库）②利用PCR技术扩增目的基因（变性，复性，延伸）③通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成目的基因来源第3页/共29页 （三）基因操作的基本步骤步骤一：目的基因的提取2）反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。目的基因的mRNA单链DNA(cDNA)双链DNA(即目的基因)反转录合成第4页/共29页 3）根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ： 根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测目的基因化学合成第5页/共29页 人工合成基因